过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号途径的作用研究

摘要

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂阻断转化生长因子(TGF)β1致肝纤维化作用的机制,探讨其抗肝纤维化的潜在作用。方法体外培养肝星状细胞株HSC-T6。观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGFβ1诱导的纤维连接蛋白(FN)表达的影响。利用Western印迹技术观察PPARγ激动剂对TGFβ1诱导的FN和Smad蛋白表达的影响。结果 (1)与1ng/mlTGFβ1组比较,5ng/ml TGFβ1组表达量增加了3.7倍(P<0.01),5ng/mlTGFβ1刺激24时较刺激前增加了2.5倍(P<0.01),TGFβ1诱导表达呈一定范围内的剂量(0～5/)和时间(0～24h)依赖效应。(2)与5ng/mlTGFβ1组比较,10μl15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组FNmRNA表达量分别降低37.4%4、1.1%和21.7%,FN蛋白表达量分别降低24.7%、37.1%和27.1%。(3)5ng/mlTGFβ1以时间(0～2)依赖方式诱导P-Smad 2/3蛋白表达量增加,作用1h达到高峰;5ng/mlTGFβ组P-Smad2/3蛋白表达量较对照组和2ng/mlTGFβ1组分别增加3.42倍和0.98倍。(4)15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组P-Smad2/3蛋白表达量与5ng/mlTGFβ1组比较分别降低61.1%、53.4%和59.4%3,种药物干预组之间P-Smad2/3蛋白表达量比较差异无统计学意义,各组Smad2和Smad3蛋白表达量无显著变化。结论 PPARγ激动剂可以抑制TGFβ1诱导的肝星状细胞株成纤维细胞FN合成,其机制可能与阻断TGFβ1/Smad信号途径有关,提示PPARγ激动剂具有抗肝纤维化的潜在作用,可能成为肝纤维化治疗新手段之一。