线粒体DNA缺失与线粒体病临床表型复杂程度的关系分析

摘要

目的探讨线粒体DNA（mtDNA）4 977 bp缺失（ΔmtDNA4977）突变比例和拷贝数与线粒体病临床表型复杂程度的关系, 为进一步明确病因提供依据。方法选取2003年12月至2013年12月北京大学第一医院160例线粒体病患者, 同时选取101名健康体检者为健康对照组。收集两组患者的外周血DNA样品, 经限制性片段长度多态性（RFLP）聚合酶链反应检测, 未发现常见的热点突变。将所有患者按起病年龄分为低年龄组（＆10岁）和高年龄组（10岁≤年龄＆20岁）, 运用实时定量聚合酶链反应检测缺失突变比例及拷贝数, 利用内参核基因计算每个细胞中mtDNA的数量;采用独立t检验、方差分析和Spearman相关分析进行统计。结果线粒体疾病组的ΔmtDNA4977突变比例在低年龄组为（2.66±0.63）%, 在高年龄组为（3.09±0.74）%, 均比健康对照组的同年龄层的突变比例高（t=8.57、4.38, P＆0.01）;平均每个细胞ΔmtDNA4977拷贝数在低年龄组为（2.79±0.50）拷贝, 在高年龄组为（2.97±0.48）拷贝, 均比健康对照组的同年龄层的突变拷贝数高（t=4.50、-3.67, P＆0.01）;ΔmtDNA4977突变比例与线粒体病的复杂程度呈正相关（低年龄组r=0.519, P＆0.01;高年龄组r= 0.772, P＆0.01）;平均每个细胞的ΔmtDNA4977拷贝数与线粒体病的复杂程度呈正相关（低年龄组r=0.389, P＆0.01;高年龄组r=0.607, P＆0.05）;平均每个细胞的总mtDNA拷贝数与线粒体病的复杂程度呈负相关（低年龄组r=-0.260, P＆0.01;高年龄组r=-0.430, P＆0.05）。结论ΔmtDNA4977突变比例和拷贝数、总mtDNA拷贝数与线粒体病的复杂程度有相关性, 其中以ΔmtDNA4977突变比例最为密切。