沉默人p38MAPK基因表达的RNA干扰的逆转录病毒载体的构建

摘要

目的 构建沉默人p38MAPK基因表达的RNA干扰的逆转录病毒表达载体.方法 查找人p 38MAPK cDNA序列,利用软件设计并合成能够形成互补双链并能转录出靶向人p38MAPK基因的 短发夹状RNA的两条寡核苷酸序列,退火后连接至线性化载体pSIREN上,获得重组质粒pSIRE N-p38MAPK,酶切和测序进行鉴定.结果 双酶切重组质粒获得特定的酶切图谱,证实所合成核酸片段的正确重组;测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同.结论 成功构建了沉默人p38MAPK基因的重组质粒pSIREN-p38MAPK.