基于TaqMan探针双重荧光PCR检测食品中肠道沙门氏菌和肠炎沙门氏菌

摘要

建立基于TaqMan探针双重重实时荧光PCR检测肠道沙门氏菌(Salmonella enterica,SP)和肠炎沙门氏菌(SalmonellaEnteritidis,SE)的方法.根据SP的aceA基因(GenBank:U43344.1)、肠炎沙门氏菌特异序列SEP(GenBank:AF370707.1),分别设计引物和探针,在aceA探针的5'端标记FAM和SEP探针的5'端标记ⅥC,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR检测方法.试验结果,58株29种不同血清型肠道沙门氏菌均扩增出aceA基因扩增曲线,SEP特异性地扩增出15株SE,而28种不同血清型沙门氏菌和17株变形杆菌等阴性对照株扩增结果均为阴性.aceA和SEP的双重荧光PCR扩增效率分别为100％和104％,R2分别为0.999和0.998,最低检测浓度分别达到280 cfu/mL和260 cfu/mL.建立的方法特异性好、灵敏度高,整个试验可在31h完成,是快速检测SP和SE的有效方法,可用于食品中SP和SE的特异性检测.