盐酸克伦特罗快速检测胶体金试纸的研制

摘要

为建立快速检测猪尿等样品中盐酸克伦特罗(CL)的胶体金免疫层析方法,用柠檬酸三钠还原氯金酸制备了胶体金,将其标记抗CL单克隆抗体,制备了金标抗体;以CL-人血清白蛋白(HSA)为包被抗原、羊抗鼠IgG为质控线二抗,制成胶体金试纸.优化了胶体金颗粒粒径、标记抗体用量和pH值等各项参数,最终确定胶体金粒径为15nm、每毫升胶体金溶液中添加20μg抗体、胶体金溶液pH值为7.4、金标抗体稀释液为添加0.1％牛血清白蛋白(BSA)的0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)、金标抗体喷涂量为50μL/cm2、CL-HSA和羊抗鼠IgG的包被浓度分别0.5 mg/mL和2 mg/mL.研制的CL胶体金试纸检测限为3 ng/mL,与莱克多巴胺、沙丁胺醇等六种β-兴奋剂类药物无交叉反应.对42份猪尿样品的检测结果与市售酶联免疫(ELISA)试剂盒的符合率为100％.试纸无需仪器辅助,操作简便,可在5min内完成,适用于对CL残留进行现场检测.