倍硫磷半抗原、人工抗原的合成和鉴定

摘要

为研究建立有机磷农药倍硫磷的免疫分析法,合成了1种倍硫磷半抗原和2种人工抗原.采用改进的方法将三氯硫磷与3-甲基4甲硫基苯酚、β-丙氨酸反应制备了倍硫磷半抗原,产物经薄层层析、1HNMR和质谱鉴定为预期产物.分别将半抗原以活泼酯法、混合酸酐法与BSA、OVA偶联制备了人工抗原BZB和BGO,通过紫外光谱鉴定证明偶联成功.用TNBS比色法测定了BZB、BGO与载体蛋白的克分子结合比,分别为29∶1和12∶1.以BZB为免疫原免疫Balb/c小鼠,以BGO为包被抗原对小鼠血清进行间接竞争ELISA分析表明,小鼠经免疫后产生了针对倍硫磷的特异性抗血清,从而进一步证明抗原合成成功.本方法为研究建立倍硫磷的免疫分析方法奠定了基础.