副溶血弧菌C20褐藻胶裂解酶的纯化及酶学特性研究

摘要

副溶血弧菌C20发酵液经离心,超滤浓缩,盐析,DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephardex G-100分离纯化得到电泳纯的褐藻胶裂解酶,其分子量为40 kD.酶的最适温度为30℃,在此温度下保温3.5 h,相对酶活仍保持在90%;酶的最适pH为7.2,在pH 7.0～7.6范围内稳定;Mg2+、Na+、NH4+、Ca2+、甲醇和适量浓度的Tween-80对酶有激活作用;Zn2+、Cu2+、Fe2+、Al3+、乙醇、丙三醇、DTT、尿素和SDS等对酶有较强的抑制作用;此褐藻胶裂解酶对聚古罗糖醛酸有很强的底物专一性,其Km值为1.38 mg/mL,Vmax为0.052 mg/(mL(min).