Lipofectamine2000介导重组siRNA质粒载体转染SGC7901的条件优化

摘要

目的 寻求Lipofectamine 2000介导外源基因体外转染胃癌细胞SCG7901的最佳条件,建立有效的转染体系.方法 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,统计分析在不同质粒与脂质体的用量比、培养基选择、转染作用时间等条件下脂质体介导外源基因导人胃癌细胞的效率.结果 用24孔板培养细胞时,在细胞融合度约90％,质粒用量为0.6μg,脂质体用量1.2μl (两者质量/体积比为1∶2),转染作用时间为8h时,转染效率为465％％,细胞存活率约78％.结论 按以上转染体系,可获得较为满意的结果.