植酸酶phy A基因克隆表达研究

摘要

通过PCR从黑曲霉(Aspergillus niger)WY49基因组中扩增出植酸酶phy A基因,将其转入毕赤酵母GS-115中,整合到酵母染色体上进行诱导表达,并对表达条件进行了优化.利用蛋白质分离纯化技术纯化重组酶并进行SDS-PAGE,结果表明,蛋白质分子量约为61kDa.植酸酶基因表达产物的理论值为50kDa,说明该植酸酶在酵母中有一定程度的糖基化.最后测定了表达产物的酶学性质,结果表明,表达产物的最适pH值为5.5,最适温度为55℃,且具有良好的pH值稳定性和热稳定性.