手工克隆方法生产转植酸酶基因猪的研究

摘要

目的:构建广西巴马小型猪p-PSP-Intron-Cafp载体并生产转植酸酶基因的猪. 方法:根据GenBank上登录的猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因序列设计合成一对特异性引物,利用PCR技术扩增广西巴马小型猪的PSP基因启动子序列,并与连有Cafp基因的重组质粒进行酶切、连接、转化,构建p-PSP-Intron-Cafp载体,利用电转方法将p-PSP-Intron-Cafp载体转入胎猪成纤维细胞中,通过荧光观察及细胞PCR鉴定的方法,证明转染成功.再将此细胞用于手工克隆的供体,生产转植酸酶基因环保猪,并进行鉴定. 结果:成功构建了p-PSP-Intron-Cafp载体,并验证其在细胞中成功表达,并生产转植酸酶基因的猪. 结论:成功获得转植酸酶基因猪.