米曲霉原生质体融合及杂合二倍体的形成

摘要

采用混合酶液处理纤维素酶高产苗株３０４２＿（Ｎ－２）（天冬酰胺缺陷型“Ａｓｎ￣－”）及蛋白酶高产菌株３０４２＿（Ｎ－１９）（蛋氨酸缺陷型“Ｍｅｔ￣－”）的营养菌丝，获得原生质体，以ＰＥＧ为助融剂进行融合处理，成功地获得了米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）原生质体的营养互补融合。将异核体菌落的菌丝转接到合有０．１％樟脑的新鲜ＭＭ上，２５℃诱导培养７─１５天，挑取绿色角变菌落的孢子，将其转接到ＭＭ上能迅速生长，经孢子大小及ＤＮＡ含量测定确定为杂合二倍体，并进行酶活测定比较。