梅毒螺旋体重组蛋白Tp0608的表达与鉴定

摘要

目的表达梅毒螺旋体（Tp）重组蛋白Tp0608（rTp0608）并鉴定其抗原性，为深入探讨其在梅毒血清学诊断中的价值奠定基础。方法PCR扩增Tp0608全长基因，构建原核表达重组体pET-28a（＋）／Tp0608，转化宿主菌诱导表达rTp0608，Ni-NTA亲和层析法纯化蛋白，SDS—PAGE分析蛋白表达形式与纯度，Westernblot鉴定rTp0608的抗原性。结果原核表达重组体pET-28a（＋）／Tp0608在宿主茵内经诱导表达了分子量大约为38kDa的重组蛋白，以包涵体表达形式为主，纯化蛋白的纯度〉95％；Westernblot结果显示纯化蛋白能被梅毒患者混合血清特异性识别。结论PET-28a（＋）表达载体高效表达了rTp0608，该重组抗原有良好的抗原性。