miR-148a-3p对LPS诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症因子的影响

摘要

目的 探讨miR-148a-3p对LPS诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症因子的影响及其机制.方法 以肾小球系膜细胞(HBZY-1)为研究对象,分为control组、LPS组(10 μg/mL)和miR-148a-3p inhibitor组3组;qPCR法检测各组细胞中miR-148a-3p的表达水平;克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞的凋亡能力;Hoeschst染色观察各组细胞的凋亡能力;qPCR和Western blot法检测各组细胞中NF-κB、IκB的表达情况;酶联免疫法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-10的含量变化.结果 与control组相比,LPS组中miR-148a-3p的表达显著上调(P＜0.001),与LPS组比较,miR-148a-3p inhibitor 组中miR-148a-3p 的表达下调(P＜0.001);与control 组相比,LPS组HBZY-1细胞增殖能力显著提高(P＜0.001),细胞凋亡能力显著下降(P=0.036),与LPS组比较,miR-148a-3p inhibitor组HBZY-1细胞增殖能力下降(P = 0.004),细胞凋亡能力提高(P＜0.001);与control组相比,LPS组HBZY-1细胞中NF-κB mRNA和蛋白的表达上调(P=0.003,P=0.004),且IκB mRNA和蛋白的表达下调(P=0.004,P＜0.001),与LPS 组比较,miR-148a-3p inhibitor组HBZY-1 细胞中NF-κB mRNA 和蛋白的表达下调(P=0.031),且IκBmRNA和蛋白的表达上调(P=0.037,P=0.005);与control组比较,LPS组HBZY-1细胞中TNF-α、IL-1β含量均增加(P=0.003,P = 0.035),IL-10含量减少(P＜0.001),与LPS 组比较,miR-148a-3p inhibitor 组HBZY-1 细胞中TNF-α、IL-1β含量均减少(P=0.025,P=0.032),IL-10含量增加(P=0.038).结论 下调miR-148a-3p的表达可以抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞的增殖能力、促进细胞凋亡、减轻炎症反应.