丙泊酚通过调控miR-574-5p/SOX2表达抑制胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移

摘要

目的 探讨丙泊酚通过调控微小RNA-574-5P(miRNA-574-5P)/性别决定区Y框蛋白(SOX2)对胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移的影响和分子机制.方法 以0、5、10和20 μg/mL丙泊酚处理AGS细胞48 h.筛选丙泊酚最佳使用浓度.将转染后的AGS细胞分为对照组、丙泊酚组、丙泊酚+miR-NC组、丙泊酚+miR-574-5p组、丙泊酚+si-con组、丙泊酚+si-SOX2组、丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA组、丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA-SOX2组.采用细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测细胞中微小RNA(miR)-574-5p的表达水平;免疫印迹法检测细胞中SOX2蛋白的表达水平.采用上述方法检测AGS细胞增殖、侵袭、迁移能力.双荧光素酶报告基因实验检测miR-574-5p与SOX2的靶向关系.结果 选择20 μg/mL丙泊酚浓度进行实验.与0μg/mL比较,5、10、20μg/mL丙泊酚处理组细胞存活率、克隆形成率、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低(P＜0.05),且呈浓度依赖性,miR-574-5P表达水平呈浓度依赖性降低,SOX2呈浓度依赖性升高(P＜0.05).与对照组比较,丙泊酚组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著降低(均P＜0.05),SOX2蛋白表达显著升高(P＜0.05).与丙泊酚+miR-NC组比较,丙泊酚+miR-574-5p组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著升高(均P＜0.05),SOX2蛋白表达显著降低(P＜0.05).与丙泊酚+si-con组比较,丙泊酚+si-SOX2组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著升高(均P＜0.05),SOX2蛋白表达显著降低(P＜0.05).与丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA组比较,丙泊酚+miR-574-5p+pcDNA-SOX2组AGS细胞存活率、克隆形成率、迁移和侵袭细胞数以及miR-574-5p表达显著降低(均P＜0.05),SOX2蛋白表达显著升高(P＜0.05).miR-574-5p直接与SOX2结合.结论 丙泊酚通过调控miR-574-5p/SOX2表达抑制胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移.