6-姜烯酚对HPV阳性及阴性宫颈癌细胞侵袭及迁移的作用及其机制

摘要

目的 观察6-姜烯酚对人乳头瘤病毒(HPV)阳性及阴性人宫颈癌细胞侵袭及迁移的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 培养HPV阳性人宫颈癌细胞(HeLa)及HPV阴性人宫颈癌细胞(C33A),分别加入0、5、10、20、50μmol/L的6-姜烯酚,并以未处理组作为对照,继续培养24 h.确定6-姜烯酚的最佳浓度为10μmol/L.后续实验以10μmol/L的6-姜烯酚分别处理24、48及72 h,采用MTS法检测细胞增殖情况,以10μmol/L 6-姜烯酚用于细胞划痕实验检测6-姜烯酚对细胞迁移能力的影响,采用Transwell小室法检测6-姜烯酚对细胞侵袭能力的影响,Western blotting检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达水平.结果 MTS检测结果表明,HeLa及C33A细胞的活力均随6-姜烯酚浓度及作用时间的增加而逐渐降低,在各浓度及作用时间点,HeLa细胞的活力降低较C33A细胞更明显;Transwell侵袭实验结果显示,6-姜烯酚对HeLa细胞作用24 h及48 h,对C33A细胞作用48 h后,细胞的侵袭能力明显降低;划痕实验结果显示,6-姜烯酚对HeLa细胞作用24 h及48 h后,对C33A细胞作用48 h后,细胞的伤口愈合率明显降低.Western blotting检测结果显示,10μmol/L 6-姜烯酚处理HeLa细胞24 h后,细胞中E-cadherin的表达增加,而N-cadherin、MMP-2及MMP-9的表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);10μmol/L 6-姜烯酚处理C33A细胞24 h后,细胞中E-cadherin的表达明显增加,而N-cadherin、MMP-2及MMP-9的表达与未处理组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 6-姜烯酚能抑制HPV阳性宫颈癌细胞的增殖并抑制细胞侵袭,其机制可能与6-姜烯酚影响上皮间充质转化相关蛋白的表达有关.