AngⅡ抑制HUVECs内皮型一氧化氮合酶的表达和NO的释放

摘要

目的：观察AngⅡ对体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）表达内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及内皮NO生成的影响，探讨其可能机制。方法：采用胰蛋白酶消化法进行HUVECs的原代培养，3～5代用于实验；通过RT—PCR和Western Blot检测eNOS的mRNA和蛋白表达水平；利用Gfiees反应原理测定上清NO释放量。结果：与无刺激组相比，AngⅡ（10^-8、10^-7、10^-6）抑制HUVECs eNOS mRNA和蛋白表达（P＜0.05）；HUVECs未受刺激时NO生成量是（50．21±4.39）μM，不同浓度的AngⅡ（10^-8、10^-7、10^-6）与HUVECs共孵育12h可明显减少NO释放（30．01±4．10）μM、（21．33±4．81）μM、（16.35±2．56）μM，使其浓度分别下降49．7％、63.4％、71．1％。结论：AngⅡ明显抑制HUVECs表达eNOS，并呈浓度效应减少内皮NO的释放。