内皮型一氧化氮合酶在TNF-α和AngⅡ致内皮细胞凋亡中的作用

摘要

目的探讨TNF-α和AngⅡ在导致内皮细胞凋亡过程中eNOS的表达变化以及NF-кB在这一过程中的作用.方法对NF-кB的抑制剂PDTC预处理和未预处理的原代培养脐静脉内皮细胞,用TNF-α和AngⅡ分别来进行干预,后用RT-PCR来检测eNOS的mRNA表达,W estern b lot来检测eNOS和IкBα的蛋白表达,EMSA来检测NF-кB的活性,TUNEL法来检测细胞的凋亡.结果在TNF-α和AngII的干预下,eNOS的mRNA和蛋白表达与对照组比较显著下降(P<0.05),细胞凋亡发生显著增加(P<0.05);NF-кB的抑制剂PDTC能抑制TNF-α和AngⅡ引起的细胞凋亡的发生,但未能抑制住TNF-α和AngⅡ引起eNOS表达的下降.结论在TNF-α和AngⅡ作用于内皮细胞时,eNOS和NF-кB对防止细胞凋亡都有保护作用,但NF-кB没有参与TNF-α和AngⅡ引起eNOS表达下降的过程.