缺氧外泌体传递miR-199a-5p对胃癌细胞SGC-7901迁移和侵袭的影响

摘要

目的 探讨缺氧环境下胃癌细胞SGC-7901源性外泌体携带miRNA对常氧胃癌细胞迁移和侵袭的作用.方法 使用含CoC12培养基培养SGC-7901细胞模拟细胞缺氧,将缺氧源性的外泌体与常氧条件下SGC-7901细胞共培养,采用划痕实验和侵袭实验检测缺氧胃癌细胞源性外泌体对常氧胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响,采用高通量测序筛查缺氧与常氧外泌体中差异表达的miRNA;并调节缺氧胃癌细胞上述差异表达miRNA水平,提取外泌体与常氧胃癌细胞共培养,采用划痕实验和侵袭实验检测外泌体携带miRNA对常氧胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 透射电子显微镜下显示,常氧和缺氧SGC-7901 细胞分泌的外泌体均呈直径为50-150nm圆形或椭圆形的杯状结构.Western免疫印记分析,常氧和缺氧SGC-7901细胞分泌外泌体均表达CD63和Tsg101蛋白标志物.划痕及侵袭实验显示,缺氧处理SGC-7901细胞分泌的外泌体共培养的常氧SGC-7901细胞划痕闭合率、移动到transwell小室下方的数量高于常氧SGC-7901细胞分泌的外泌体共培养的常氧SGC-7901 细胞(P＜0.05).测序和RT-PCR检测显示,缺氧外泌体中miR-199a-5p的表达高于常氧外泌体(P＜0.05).划痕及侵袭实验显示,导入miR-199a-5p mimics细胞来源的外泌体共培养的常氧SGC-7901细胞划痕闭合率、移动到transwell小室下方的数量高于导入miR-199a-5p mimicsNC细胞来源的外泌体共培养的常氧SGC-7901细胞(P＜0.05).结论 缺氧微环境可能会刺激胃癌细胞产生富含miR-199a-5p的外泌体,并将其输送至周围常氧胃癌细胞以促进其迁移和侵袭.