嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法及影响因素的研究

摘要

对嗜酸乳杆菌S层蛋白的提取方法进行了改进.用酸性5 mol/L LiCl法,中性5 mol/L LiCl法和8mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白,考马斯亮兰法测蛋白浓度,进行常规SDS-PAGE,用Gel-Pro软件进行数据分析,得出其中酸性5 mol/L LiCl法提取表层蛋白百分含量最多.分析影响提取条件的因素,设置O、4、室温(25℃)3个温度梯度和10、15、20、25、30min 5个时间梯度,进行常规SDS-PAGE,检测提取表层蛋白的效果.Sephadex G-100柱分离中性5 mol/L LiCl法和8 mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白获得SA蛋白.酸性5 mol/L LiCl法可用于分析各种表层蛋白;中性5 mol/L LiC1法和8 mol/L尿素法用于提取43 kDa的SA蛋白.25℃处理15 min得到最大量的表层蛋白.