汉坦病毒囊膜糖蛋白G1基因重组腺病毒载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达

摘要

拟构建汉坦病毒G1基因重组腺病毒载体并在Vero E6细胞中表达,为汉坦病毒基因疫苗的研究提供实验基础.PCR法从含汉坦病毒-76118株M基因的M56质粒扩增糖蛋白G1基因片段,利用穿梭质粒pShuttle,将其克隆入Adeno-X病毒DNA,获得重组腺病毒DNA,转染HEK293细胞,包装、扩增后得到汉坦病毒G1基因重组腺病毒原种,感染Vero E6细胞,用IFA法和ELISA法检测表达产物.得到了含汉坦病毒G1基因的重组腺病毒,其滴度约为1011pfu/ml,感染Vero E6细胞后检测到汉坦病毒糖蛋白G1的表达.