重组人肿瘤坏死因子α抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学活性检测

摘要

目的：评价原核表达、纯化的6×His-硫氧还蛋白(TRX)-人肿瘤坏死因子α(TNFα)抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学功能。方法：在大肠杆菌中分别表达带 His 标签的 TRX 对照蛋白及 TRX 蛋白融合的人 TNFα抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白，并对2种蛋白进行 N2+金属螯合层析纯化，采用 MTT 法检测纯化后的蛋白及化学合成多肽抑制 TNFα标准品对 L929细胞的细胞毒活性。结果：与对照蛋白相比，融合蛋白人 TNFα抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴及合成多肽均能拮抗 TNFα标准品对 L929细胞的细胞毒作用。结论：融合蛋白人 TNFα抑制肽-C 端抗炎酸性尾巴及合成肽均能有效拮抗 TNFα的生物学作用，为今后发展抑制 TNFα为主的抗炎生物药物奠定了基础。%10.3969/j.issn.1009-0002.2012.06.016