重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白抗体中和活性检测方法的建立

摘要

目的:建立重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白(TMP-Fc)抗体中和活性的检测方法,并应用于免疫原性研究中的样品分析.方法:基于M07e细胞依赖于TMP-Fc增殖的活性检测方法,以及TMP-Fc的阳性中和抗体对M07e细胞增殖的抑制作用,建立TMP-Fc抗体中和活性检测方法.结果:TMP-Fc对M07e细胞的增殖具有促进作用,在3.2～80 ng/mL浓度范围内作用显著;阳性血清稀释率低于1/10 000时,对M07e细胞的增殖有明显抑制作用;检测方法经优化,确定最佳血清稀释率为1/20,最佳药物浓度为16 ng/mL;实验阈值(CP)确定为23.78％.免疫原性结果显示,TMP-Fc与罗米司亭在300 μg/kg剂量下中和抗体个体发生率分别为30％和40％,表明二者在免疫原性方面类似.结论:建立了一种TMP-Fc抗体中和活性检测方法,并应用于免疫原性研究的样品分析,为TMP-Fc在长期毒性实验中的免疫原性评价提供了有效的检测手段.