TPO模拟肽与人IgG1Fc融合蛋白在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

叶祥忠; 郭强; 李朝; 刘凤云; 程度胜

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TPO模拟肽与人IgG1Fc融合蛋白在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

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构建TPO模拟肽与人IgG1Fc融合蛋白的酵母表达体系.利用PCR技术,从重组质粒pET28a-TMPFc中,扩增TPO模拟肽与人IgG1Fc 的DNA片段,连入pPICZαA酵母表达载体,电激法转化毕赤酵母.用MDH和MMH筛选具有正确表型的重组转化子,PCR、蛋白质印迹鉴定融合基因.MTT法鉴定TMPFc对Ba/F3-mpl细胞生长的促进作用.构建的重组毕赤酵母实现了TMPFc的分泌表达,表达量占外分泌蛋白质的65%.表达蛋白质的相对分子量约64kD,对Ba/F3-mpl生长具有促进作用.TMPFc酵母表达体系表达出可观的二价模拟肽,为二价TMP活性的定量研究奠定基础.

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来源
《生物工程学报》 |2004年第1期|25-29|共5页
作者
叶祥忠; 郭强; 李朝; 刘凤云; 程度胜;
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作者单位

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

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正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
TPO模拟肽; 毕赤酵母; 融合蛋白;

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