MAPK/JNK信号通路介导血管紧张素Ⅱ促进成骨细胞凋亡的研究

摘要

目的 研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)调控小鼠成骨细胞凋亡的分子机制.方法 用10-6 mol/L AngⅡ刺激小鼠成骨细胞24 h,利用原位末端转移酶标记技术检测成骨细胞凋亡情况.并将成骨细胞分为4组,对照组(α-MEM培养基处理细胞1 h);AngⅡ组(10-6 mol/L AngⅡ处理细胞1 h);AngⅡ+SP600125组[使用c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路抑制剂(SP600125)预处理细胞1 h,再用AngⅡ处理1h];AngⅡ+vehicle组(加入对应量的二甲基亚砜预处理1 h,再用AngⅡ处理细胞1 h).利用免疫印迹法检测凋亡信号通路相关蛋白(Bax、Bcl-2、细胞色素C)及应激活化蛋白激酶(SAPK)/JNK信号通路的表达,同时使用试剂盒检测Caspase-3活性.结果 10-6 mol/L AngⅡ处理后,成骨细胞凋亡数目增加2倍,同时细胞内SAPK/JNK通路活化,Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增加,细胞色素C从细胞核内向细胞质内转移增加,Caspase-3活性明显增加,而使用SP600125后可明显抑制上述改变.结论 Ang Ⅱ可促进小鼠成骨细胞凋亡,凋亡效应可由SAPK/JNK通路所介导.