40例慢性乙型肝炎患者血清HBV P基因变异及突变频率检测

摘要

目的 观察核苷(酸)类药治疗不同时间段慢性HBV感染患者血清乙型肝炎病毒聚合酶(HBV P)基因序列变异特点及突变频率.方法 运用焦磷酸测序仪器配套的软件Assay Design SW在目的区域两端保守区域设计PCR引物及测序引物,采用套式PCR方法检测血清中HBV-DNA,按照PyroMark ID遗传分析系统用SNP模式进行PCR产物HBV相关位点的焦磷酸测序；40例慢性HBV感染患者进行P基因变异、突变频率检测的同时测定HBV-DNA、HBV M、ALT.结果 40例患者中18例发生变异,变异模式以经典突变L180M、M204V/I、A181V/T、N236T突变为主,加少量V173L、S202G突变；发生变异者耐药突变型在样本中所占比例由20％到100％；HBV P基因变异可以在HBV-DNA、ALT发生突破前、中、后检出；HBeAg、HBeAb阳性者P基因变异率分别为46.2％(12/26)、41.7％(5/12) (P＞0.05),两例HBeAg、HBeAb均阴性者中1例P基因区变异.结论 焦磷酸测序可以快速、准确的检测出HBV P基因变异；HBV P基因变异模式、突变频率与核苷类药物敏感性密切相关.