人血清IL-6电化学发光检测方法的建立

摘要

目的通过双抗体夹心一步法的原理,建立一种检测人血清白细胞介素6(IL-6)的电化学发光免疫分析方法。方法将标本、生物素化的IL-6单克隆抗体和三联吡啶钌标记的IL-6单克隆抗体反应以形成抗原抗体夹心复合物,然后与链霉亲和素包被的磁微粒结合,形成的复合物通过磁场清洗,从而将未结合的物质除去。然后加入三丙胺激发缓冲液,从而检测相对光子强度(relative light units,RLU)。结果本研究建立的方法,最低检测限为1.5pg/mL,线性范围为1.5~5000 pg/mL,准确度为0.900~1.100,批内变异小于8%,批间变异小于10%。与罗氏公司IL-6检测试剂盒相关系数为r=0.9996(n=75),经过37℃7 d热处理后的试剂,各项性能指标均达标,检测结果差异不大(线性相关系数r=0.9972,准确度高值0.951,准确度低值0.947,批内精密度(CV)高值2.81%,低值1.63%)。结论该方法灵敏度高、线性范围广、准确度高、稳定性好,各种指标都能达到临床检测要求,可以推广使用。