幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB在大肠杆菌中的温控表达及其免疫反应性检测

摘要

目的:在温控表达载体pBV220中实现幽门螺杆菌(H.pylori)融合蛋白HspA-UreB的表达,并研究其免疫反应性.方法:含重组表达质粒pBV-HU27的大肠杆菌DH5α经30℃增菌后,在42℃下诱导表达,SDS-PAGE分析融合蛋白表达含量,与H.pylori全菌免疫小鼠血清和H.pylori感染患者血清进行Western blot分析,检测融合蛋白的免疫反应性.结果:SDS-PAGE分析结果显示在76 500处出现特异蛋白带,诱导4 h即可达到最高量,融合蛋白HspA-UreB占全菌蛋白含量的10%,该融合蛋白可以被H.pylori免疫小鼠血清和H.pylori阳性患者血清中的相应抗体所识别.结论:H.pylori融合蛋白HspA-UreB可以在温控表达载体中正确表达,且具有良好的免疫反应性.