人16周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定

摘要

本文从１６周的胎儿脑中抽提总ｍＲＮＡ，经过一系列酶促反应后合成ｃＤＮＡ，分级分离柱除去小片段ＤＮＡ后克隆到λｇｔ１０载体中，转染宿主菌Ｃ６００ｈｆｌ，文库包装效率为４．２×１０＾６ｐｆｕ／ｕｇ，得到的原始克隆数为２．１×１０＾６，ｃＤＮＡ插入片段平均大于１．２ｋｐｂ．根据已知序列设计引物，从这个ｃＤＮＡ文库中扩增出血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的全长ｃＤＮＡ基因。