大鼠微粒体谷胱甘肽S-转移酶1对苯丁酸氮芥体外致肿瘤细胞毒性的影响

摘要

目的:基于苯丁酸氮芥(chlorambucil,CHB)激活微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,mGST1)可显著加快催化CHB-GSH结合效应,探讨大鼠mGST1激活对CHB致不同来源肿瘤细胞株毒性的影响.方法:取雄性Sprague-Dawley大鼠肝脏,制备微粒体,去除胞浆GST的污染,获得纯化mGST1并测其活性.分别设CHB组,CHB+GSH对照组以及CHB+GSH+mGST1组.分别与PC-3、K562、HepG2和P388D1细胞株培养24 h、48 h、72 h后,以IC50作为细胞损伤指标;作用8 h后以JC-1染色评价线粒体膜电位(△ψm)改变作为损伤早期指标;作用48 h以后以AO/EB染色差异作为细胞核损伤后期指标.结果:在mGST1存在环境下,24 h、48 h、72 h PC-3、K562、HepG2和P388D1细胞株IC50均有显著增加.72 h CHB+GSH对照组PC-3、K562、HepG2和P388D1细胞株的IC50分别为(6.13±2.42)μmol/L、(3.77±0.95)μmol/L、(5.36±3.06)μmol/L和(9.42±1.77)μmol/L;CHB+GSH+mGST1组显著高于CHB+GSH对照组,相应IC50(15.01±3.47)μmol/L(P＜0.001)、(8.33±1.72)μmol/L(P＜0.001),(26.74±5.45)μmol/L(P＜0.001)和(16.93±0.85)μmol/L(P＜0.001).并伴有线粒体△ψm降低和核损伤减轻,呈明显的时效关系.结论:mGST1在富含GSH溶液中,可显著降低CHB对上述肿瘤细胞株的细胞毒性作用.