微粒体

摘要： 子痫前期是导致孕产妇和围生儿死亡的妊娠期特发性疾病之一,至今其具体发病机制尚未阐明.目前研究认为子痫前期发病主要与胎盘滋养细胞侵袭异常导致子宫螺旋小动脉重铸受阻、血管内皮细胞损伤、炎症免疫反应过度激活等有关.最新研究表明,微粒可导致子痫前期患者的全身炎症反应,并通过调节中性粒细胞胞外诱捕网的释放参与子痫前期的发病.同时相关研究显示,中性粒细胞活化并黏附到血管内皮细胞激发炎症反应是子痫前期患者血管内皮损伤的关键环节.当活化的中性粒细胞形成中性粒细胞胞外诱捕网过量或未被机体及时清除时,中性粒细胞胞外诱捕网附着于血管内皮上,引起内皮细胞凋亡,从而导致血管内皮细胞损伤.现对微粒调控中性粒细胞胞外诱捕网的释放在子痫前期发病中作用的研究进展进行综述.

摘要： 抗生素因具有抗菌谱广、杀菌性强等特点而被广泛应用于人类医药、畜牧业、农业和水产养殖业.其进入水生生物体内后,会在药物代谢酶的作用下发生代谢转化,产生生态毒性.采用鲫鱼肝微粒体体外孵育法,探究恩诺沙星细胞色素P450酶作用下的代谢转化过程,并通过代谢抑制实验确定关键的代谢酶.结果表明,恩诺沙星体外代谢过程符合一级动力学方程,当恩诺沙星暴露浓度为1 mg·L-1时,其在肝微粒体中的消除速率常数(k)最大为0.00303 min-1,半衰期(t1/2)最短为228.8 min,应用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,检测到了恩诺沙星脱乙基产物和羟基化产物;代谢抑制实验结果表明,CYP3 A4在恩诺沙星代谢过程中起主要作用,是恩诺沙星代谢的关键酶.本研究结果为深入了解恩诺沙星在水生生物体内的代谢转化及其生态风险提供了基础数据.

摘要： 免疫性血小板减少症(ITP)为一种获得性自身免疫性出血性疾病,该病涉及血小板破坏增加与血小板生成不足导致的血小板计数减少,伴或者不伴出血的临床表现.ITP患者血小板计数减少可以导致机体凝血功能障碍引起出血,但是出血情况的严重程度并不完全与血小板计数减少程度呈正相关关系.部分患者血小板计数即使极低亦无明显出血现象,这表明存在额外的机制代偿凝血功能,并改善这些患者的出血情况.笔者拟就近年有关ITP患者凝血代偿机制的研究进展进行综述.%Immune thrombocytopenia (ITP) is an acquired autoimmune hemorrhagic disease involving increased platelet destruction and insufficient platelet production,leading to thrombocytopenia,with or without clinical manifestations of bleeding.Although thrombocytopenia may cause coagulation dysfunction and hemorrhagic complications,the bleeding severity is not certainly proportional to the number of platelets.In some cases,there is no significant bleeding symptom even the platelet count is extremely low,which suggests there are additional compensatory mechanisms to control or ameliorate the bleeding complications in ITP patients.The present article aims to review recent investigations on the compensatory mechanisms of coagulation function in the patients with ITP.

摘要： 目的:探讨吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体细胞色素P450(CYP450)活性水平的影响.方法:40只大鼠随机均分为正常对照组、糖尿病组、低剂量(3 mg/kg)吡格列酮组、高剂量(6 mg/kg)吡格列酮组(n=10).除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养4周,采用链脲佐菌素(50 mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型.造模成功后,低、高剂量吡格列酮组大鼠给予相应剂量吡格列酮灌胃治疗2周,提取大鼠肝脏微粒体并检测CYP450活性水平,同时进行大鼠体质量和血糖指标的检测.结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖升高(P<0.01),CYP450活性水平升高(P<0.05),体质量下降(P<0.01).与糖尿病组相比,吡格列酮灌胃2周期间,大鼠血糖浓度随吡格列酮浓度升高显著降低(P<0.01),低、高剂量吡格列酮组大鼠肝微粒体CYP450水平均明显降低(P<0.01),体质量明显升高(P<0.05).相关分析显示,CYP450活性水平与大鼠血糖正相关(r=0.598,P<0.01),而与大鼠体质量无明显相关性.结论:吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体CYP450酶活性有显著抑制作用,能改善其高血糖状态,增加大鼠体质量.

摘要： 目的 通过优化玻璃珠破碎法的条件,制备最具活性的重组人CYP2C9酵母微粒体,从而为建立更加灵敏快捷的体外代谢筛选模型提供依据.方法 利用玻璃珠破碎的方法,制备重组人CYP2C9酵母微粒体.通过改变涡旋振荡次数和玻璃珠用量,优化制备微粒体的条件.用Lowry法测定微粒体中的蛋白含量,用CYP2C9的典型底物双氯芬酸与微粒体进行反应,以单位时间(h)内单位蛋白(mg/ml)所对应的双氯芬酸代谢物4-羟基双氯芬酸的生成量来确定微粒体的蛋白活性.结果 随着涡旋振荡次数和玻璃珠用量的增加,所制备微粒体蛋白的含量增加.当涡旋振荡次数为30次(每次涡旋振荡30 s,冷却60 s),玻璃珠用量为0.75 g时,代谢物生成量和单位时间单位蛋白所对应代谢物生成量最大,分别为1.21μg和0.06μg/[(mg/ml)·h].结论 玻璃珠破碎法制备重组人CYP2C9酵母微粒体的最佳条件为涡旋振荡30次(每次涡旋振荡30 s,冷却60 s)和0.75 g玻璃珠.

摘要： 微粒体是细胞活化、凋亡过程中形成的微小颗粒.微粒体目前被认为是炎症反应的主要介质,可能在动脉粥样硬化斑块形成和随后导致急性冠脉综合征的发生、发展、形成中起作用.微粒体参与了动脉粥样硬化斑块的形成及破裂、凝血的启动以及血栓的形成,通过对微粒体的研究,可以增加对冠状动脉粥样硬化性心脏病发病机制的认识.%The microparticle is a kind of small particle formed in the process of cell activation and apoptosis.Currently,the mi-croparticle is taken as the main medium of inflammatory reaction.However,it may also play a role of atherosclerotic plaque formation and subsequent onset,development and formation of acute coronary syndrome.Furthermore,the microparticle participates in the atherosclerotic plaque formation and rupture,coagulation startup and thrombus formation.Through the study of microparticle,the coronary atherosclerotic heart disease pathogenesis can be deeply understood.

摘要： 目的:研究桂郁金水提物对大鼠肝脏胞浆液和微粒体内抗氧化酶和药物代谢酶的影响.方法:用差速离心法制备肝脏胞浆液及微粒体,测定抗氧化酶(GSH-Px、GR、SOD和CAT)、Ⅰ相代谢酶NADPH-细胞色素P-450还原酶、CYP3A、CYP2E1和11相代谢酶GST、UGT的活性.结果:(1)桂郁金水提液0.81g/kg、2.43g/kg和7.29g/kg,一日一次,雄性SD大鼠连续灌胃给药3周,对大鼠体重增长和肝脏指数及血清ALT、AST含量均无明显的影响;桂郁金各剂量组明显降低血清Cr含量(P＜0.05);中(P＜0.05)、高剂量(P＜0.01)组明显降低了血清BUN含量;高剂量组(P＜0.01)明显降低血清GST活性.(2)在肝胞浆液,与空白组比较,桂郁金各剂量组均明显增高GSH-Px活性;桂郁金中(P＜0.01)、高剂量(P＜0.05)明显增高SOD活性;桂郁金高剂量明显增高GR活性(P＜0.05).(3)在肝微粒体中,与空白组比较,桂郁金各剂量对NADPH-细胞色素P-450还原酶活性没有显著的影响;但明显降低CYP3A活性(P＜0.05);桂郁金低、中剂量组显著增高CYP2E1活性(P＜0.01);桂郁金各剂量组(P＜0.05)明显增高GST活性;但对UGT的活性均没有显著影响.结论:(1)桂郁金对大鼠肝脏和肾脏没有毒性,同时,桂郁金可能对肝、肾有保护作用;(2)桂郁金可诱导体内的抗氧化酶;(3)临床上当CYP3A底物类药物与桂郁金合并用药时,应考虑到可能存在的代谢性药物相互作用;(4)临床上由CYP2E1代谢的药物与桂郁金合用时,应注意调整这些药物的使用剂量或换用其他药物.

摘要： 目的：研究大鼠肝微粒体中雷公藤甲素酶动力学特征,初步推测参与雷公藤甲素羟化代谢的CYP450酶的亚型.方法：采用大鼠肝微粒体研究雷公藤甲素的酶动力学,探讨cYP450酶的选择性抑制剂对代谢的影响及参与其代谢的酶.结果：研究表明CYP2Cll抑制剂西米替丁可以显著性抑制雷公藤甲素的代谢,使其代谢速率明显下降.其他代谢酶抑制剂酮康唑(Ket,CYP3A抑制剂)、奥芬得林(Orp,CYP2B抑制剂)和奎尼丁(Qui,CYP2D抑制剂)对其代谢也有一定的影响,但影响不如CYP2C11强.结论 在雷公藤甲素羟化过程中CYP2C11参与了TP的代谢.

摘要： 为了更好地了解喹乙醇的代谢特点,本文用猪肝微粒体、血液和喹乙醇孵育,HPLC检测,发现喹乙醇至少能生成三种还原代谢物:N1-还原喹乙醇,N4-还原喹乙醇和N1,N4-还原喹乙醇,其中N1-还原喹乙醇的活性最高.对N1-还原喹乙醇的生成规律进一步研究,结果发现:NAD(P)H和NADPH生成系统都能还原喹乙醇,核黄素对NAD(P)H的还原有显著增强作用,煮沸的微粒体失去还原活性,空气和CO对其还原有抑制作用;血红蛋白也存在还原作用,但核黄素对其无增强作用,血浆和煮沸的血红蛋白无还原作用;用六种CYP450同工酶的选择性抑制剂对喹乙醇的代谢进一步研究:α-萘黄酮(CYP1A)、8-甲氧补骨脂素(CYP2A6)、磺胺苯吡唑(CYP2C)、奎尼丁(CYP2D6)、4-甲基吡唑(CYP2E1)、醋竹桃霉素(CYP3A4),发现CYP2A6和CYP2E1的抑制剂8-甲氧补骨脂素和4-甲基吡唑对喹乙醇的N1还原有抑制作用.结果表明:喹乙醇可能是经还原酶和细胞色素P450催化还原,参与N1还原的CYP450可能是CYP2A6和CYP2E1;对喹乙醇在微粒体中的N1还原机制进行了推导,喹乙醇不能直接被NAD(P)H还原,必须分两步完成,第一步是还原型的吡啶核苷酸在NADPH-细胞色素P450还原酶或NADH-细胞色素b5还原酶的作用下,把氢和电子传递给核黄素,还原的核黄素再把CYP450还原,第二步是还原的CYP450充当电子传递体在酶作用下还原喹乙醇.

摘要： 目的：研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制。rn 方法：通过研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运，考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂verapami及温度对蛇床子素的转运的影响。rn 结果：随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高，蛇床子素在Caco-2细胞中AP-BL的转运量增加;PEG600对蛇床子素在Caco-2细胞中的AP-BL的转运量有显著增加;P-gp抑制剂verapamil对蛇床子素在Caco-2细胞中转运的表观通透系数PAP和PBL无显著影响。rn 结论：蛇床子素表观通透系数PAP大于10×10-6cm·s-1，较易被Caco-2细胞吸收，但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP和PBL比值无明显变化、P-gp抑制剂对PAP和PBL无明显影响及转运的活化能较低(4.14 Kcal·mole-1)，因此，蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制主要是被动转运。

摘要： 目的：研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制。rn 方法：通过研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运，考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂verapami及温度对蛇床子素的转运的影响。rn 结果：随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高，蛇床子素在Caco-2细胞中AP-BL的转运量增加;PEG600对蛇床子素在Caco-2细胞中的AP-BL的转运量有显著增加;P-gp抑制剂verapamil对蛇床子素在Caco-2细胞中转运的表观通透系数PAP和PBL无显著影响。rn 结论：蛇床子素表观通透系数PAP大于10×10-6cm·s-1，较易被Caco-2细胞吸收，但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP和PBL比值无明显变化、P-gp抑制剂对PAP和PBL无明显影响及转运的活化能较低(4.14 Kcal·mole-1)，因此，蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制主要是被动转运。

摘要： 目的：研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制。rn 方法：通过研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运，考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂verapami及温度对蛇床子素的转运的影响。rn 结果：随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高，蛇床子素在Caco-2细胞中AP-BL的转运量增加;PEG600对蛇床子素在Caco-2细胞中的AP-BL的转运量有显著增加;P-gp抑制剂verapamil对蛇床子素在Caco-2细胞中转运的表观通透系数PAP和PBL无显著影响。rn 结论：蛇床子素表观通透系数PAP大于10×10-6cm·s-1，较易被Caco-2细胞吸收，但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP和PBL比值无明显变化、P-gp抑制剂对PAP和PBL无明显影响及转运的活化能较低(4.14 Kcal·mole-1)，因此，蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制主要是被动转运。

摘要： 目的：研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制。rn 方法：通过研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运，考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂verapami及温度对蛇床子素的转运的影响。rn 结果：随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高，蛇床子素在Caco-2细胞中AP-BL的转运量增加;PEG600对蛇床子素在Caco-2细胞中的AP-BL的转运量有显著增加;P-gp抑制剂verapamil对蛇床子素在Caco-2细胞中转运的表观通透系数PAP和PBL无显著影响。rn 结论：蛇床子素表观通透系数PAP大于10×10-6cm·s-1，较易被Caco-2细胞吸收，但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP和PBL比值无明显变化、P-gp抑制剂对PAP和PBL无明显影响及转运的活化能较低(4.14 Kcal·mole-1)，因此，蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制主要是被动转运。

摘要： 目的：研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制。rn 方法：通过研究蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运，考察蛇床子素浓度、PEG600、P-gp抑制剂verapami及温度对蛇床子素的转运的影响。rn 结果：随着蛇床子素溶液浓度和温度的升高，蛇床子素在Caco-2细胞中AP-BL的转运量增加;PEG600对蛇床子素在Caco-2细胞中的AP-BL的转运量有显著增加;P-gp抑制剂verapamil对蛇床子素在Caco-2细胞中转运的表观通透系数PAP和PBL无显著影响。rn 结论：蛇床子素表观通透系数PAP大于10×10-6cm·s-1，较易被Caco-2细胞吸收，但由于3个浓度蛇床子素溶液的PAP和PBL比值无明显变化、P-gp抑制剂对PAP和PBL无明显影响及转运的活化能较低(4.14 Kcal·mole-1)，因此，蛇床子素在Caco-2细胞模型中的转运机制主要是被动转运。

摘要： 本发明公开一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，包括以下步骤：(1)将氯化石蜡溶于有机溶剂，得到氯化石蜡溶液，并向其中加入血清，静置平衡后得到底物体系；(2)向底物体系先后加入磷酸钾缓冲溶液、肝微粒体和NADPH酶再生体系，摇匀后得到最终反应体系，然后置于37°C水浴中振荡反应；(3)向步骤(2)的反应体系加入冰冷的有机溶剂终止反应，然后进行离心，取上层清液，测定氯化石蜡含量。本发明采用血清作为氯化石蜡的载体，促进氯化石蜡与肝微粒体反应，显著提高氯化石蜡的代谢清除率，实现肝微粒体离体代谢氯化石蜡的代谢清除率的测定。

摘要： 本发明公开血清作为在体外肝微粒体代谢体系中溶解卤代有机污染物试剂的用途，还提供了一种体外肝微粒体代谢卤代有机污染物的方法。本发明解决现有技术中有机溶剂抑制代谢酶活性的问题，使体外肝微粒体代谢卤代有机污染物的反应能更加真实地模拟出肝微粒体在体内的代谢转化情况，更能真实地反映出卤代有机污染物在动物体内的代谢特征。

摘要： 本发明提供了一种用于分析PCB95及其代谢物在鸡肝微粒体中代谢行为的方法，涉及环境毒理学技术领域。所述方法包括以下步骤：(a)建立鸡肝微粒体孵育体系；(b)将不同浓度的PCB95及其代谢物在鸡肝微粒体孵育液中孵育代谢；(c)以气相色谱仪和电子捕获检测器测定孵育液中PCB95及其代谢物的含量；(d)根据定量结果，分析评价PCB95及其代谢物在鸡肝微粒体中的特征代谢行为和毒性差异。该方法可以同时分析PCB95及其代谢物在鸡肝微粒体中代谢情况，操作简单、分析速度快。

摘要： 本发明公开一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，包括以下步骤：(1)将氯化石蜡溶于有机溶剂，得到氯化石蜡溶液，并向其中加入血清，静置平衡后得到底物体系；(2)向底物体系先后加入磷酸钾缓冲溶液、肝微粒体和NADPH酶再生体系，摇匀后得到最终反应体系，然后置于37°C水浴中振荡反应；(3)向步骤(2)的反应体系加入冰冷的有机溶剂终止反应，然后进行离心，取上层清液，测定氯化石蜡含量。本发明采用血清作为氯化石蜡的载体，促进氯化石蜡与肝微粒体反应，显著提高氯化石蜡的代谢清除率，实现肝微粒体离体代谢氯化石蜡的代谢清除率的测定。

摘要： 本发明涉及优化和标准化微粒体的分离方法及其意义和应用，包括先以3000g的离心速度于4°C下离心20min以清除血小板碎片，再以20000g的离心速度收获微粒体沉淀。本发明跟传统的微粒体分离方法明显不同，优化并标准化了微粒体的分离方法，重新定义获得微粒体的生理功能，澄清传统方法获得微粒体功能的某些错误认识，并将有助于对其特性和生理功能的重新进行深入研究，据此开发新的临床诊断标记。

摘要： 本发明公开血清作为在体外肝微粒体代谢体系中溶解卤代有机污染物试剂的用途，还提供了一种体外肝微粒体代谢卤代有机污染物的方法。本发明解决现有技术中有机溶剂抑制代谢酶活性的问题，使体外肝微粒体代谢卤代有机污染物的反应能更加真实地模拟出肝微粒体在体内的代谢转化情况，更能真实地反映出卤代有机污染物在动物体内的代谢特征。

摘要： 本申请涉及化学医药技术领域，尤其涉及一种呋喃苯甲酸类化合物作为微粒体前列腺素E2合酶1抑制剂的应用，该呋喃苯甲酸类化合物的化学结构通式如说明书中式I所示。该呋喃苯甲酸类化合物可以降低PGE2的生成，抑制mPGES‑1蛋白的活性，因此，该类呋喃苯甲酸类化合物可以被开发为一种新型的抗炎mPGES‑1抑制剂，在临床上具有很好的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种人肝微粒体与细胞共培养体系及其构建方法和应用。人的肝源很难保证无菌，在制备人源肝微粒体时，几乎无法获得无菌的肝微粒。为了将人源肝微粒体与细胞共培养进行体外代谢试验研究，本发明提供了一种能够将有菌的人肝微粒体与无菌细胞直接接触的共培养方法，成功构建了人肝微粒体与细胞共培养体系。试验证明，本发明的构建方法能够保证人肝微粒体中的污染源无法对细胞的无菌环境造成影响，维持细胞正常生长的无菌状态。并且，该方法适用于外源物质(如烟碱、烟气)体外代谢研究，为人源肝微粒体与细胞共同作用的体外代谢研究奠定了基础。

摘要： 本发明涉及一种多细胞和人肝微粒体共培养方法、共培养培养基及其应用。本发明提供了多细胞和人肝微粒体共培养方法，包括收集细胞、接种细胞、装载人肝微粒体以及共培养步骤，首次实现了Beas‑2b、HUVEC、人肺巨噬细胞和人肝微粒体的体外共培养，为表征肺、血液循环、肝脏共同参与的暴露和代谢后再次损伤的研究奠定了基础。

摘要： 本实用新型公开了一种体外微粒体产品分装保存一体化装置，包括至少一下盒和一覆盖于下盒上的上盒，所述下盒内设中空腔体，其内放置有冷源，上盒顶部设置两个向下凹陷的中空槽，第一中空槽由底部支撑板和分别连接支撑板两侧的支撑杆形成，所述支撑杆顶端与上盒内顶壁连接，所述第一中空槽内承放有试管架，第二中空槽内放置有加样槽，所述加样槽顶部外沿设置卡接部，所述加样槽卡接在中空槽内。本实用新型提供的一种体外微粒体产品分装保存一体化装置，通过下盒放置冷源，保证了产品在分装过程中的良好低温环境的维持，进而提高了产品酶活性等。通过上盒配制加样槽和试管架，节省了所需的实验室台面操作空间，可支持大批量产品分装。