硅胶柱层析法分离普那霉素

摘要

通过硅胶柱层析法在等度洗脱方式下对始旋链霉菌发酵产生的普那霉素进行分离纯化.结果表明,以体积比为90:10的二氯甲烷和甲醇或者体积比为60:35:5的二氯甲烷、乙酸乙酯和乙醇作为展开剂,采用硅胶GF254单向一次薄层层析(展开距离为5.0～6.0 cm,展开时间为6～7 min)即可对普那霉素作初步定性分析.柱层析操作的适宜条件为:25 ℃,以100～200目的硅胶为固定相,洗脱剂为体积比为80:35:5的二氯甲烷、乙酸乙酯和乙醇,流速为2.0 mL/min,普那霉素的进样质量浓度为2.26 g/L,硅胶的总负载量约为0.81 mg/g.在此条件下能够分离得到纯度在95%以上的普那霉素,产品回收率保持在95%以上.