新制癌菌素诱导小鼠海马神经元细胞DNA损伤的作用研究

摘要

为了探索化学诱导物新制癌菌素(NCS)对小鼠海马神经元细胞株HT22 DNA损伤的影响,研究以9Gy X射线辐照为阳性对照组,通过CCK8试剂盒法检测绘制NCS作用下HT22细胞生长曲线以明确NCS处理细胞的最佳浓度,经Hoechst染色和TUNEL染色观察该剂量NCS对细胞DNA损伤及凋亡的影响,用免疫荧光染色结合Western blot分析HT22细胞核中DNA损伤反应酶PARP1的表达变化.结果显示,NCS作用的终质量浓度为1 000 ng/m L时,从48 h起对HT22细胞增殖表现出显著的抑制作用;Hoechst染色可见NCS作用下HT22细胞DNA损伤加剧,TUNEL染色提示NCS能够诱导细胞凋亡;免疫荧光染色和Western-blot实验显示NCS能够促进细胞核内PARP1的表达.说明化学诱导剂NCS能够引起HT22细胞DNA损伤及凋亡以及上调DNA损伤反应酶PARP1的表达,可以用于模拟大剂量射线对细胞的辐射损伤效应.