基因放射性核素反义治疗肾癌的体内外实验研究

摘要

目的 探讨Ki67基因放射性核素反义治疗对人肾癌细胞生长及凋亡的影响.方法 人工合成Ki67基因反义核酸(ASODNs),氯胺-T法125I标记ASODNs(125I-ASODNs).①体外实验:125I-ASODNs(10.0 μmol/L、2.59 MBq/L)转染人肾癌786-0细胞,采用免疫组化、Western blot检测Ki67表达;免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡.以ASODNs(10.0 μmol/L)为对照.②动物实验:建立786-0细胞BALB/C-nu裸鼠模型,125I-ASODNs治疗组瘤体注射0.1 ml 125I-ASODNs(7.4 MBq /L、10 nmol),ASODNs治疗组瘤体注射0.1 ml ASODNs(10 nmol),连续4天.药物处理后第6天取瘤组织检测肿瘤体积、Ki67表达、细胞凋亡.结果 ①体外实验:125I-ASODNs治疗组肾癌细胞Ki67表达阳性率[(21.5±1.2)%]降低,Ki67蛋白[(49.9±4.5)%]降低,细胞凋亡率[(28.9±1.3)%]升高,与ASODNs治疗组[(29.9±0.4)%、(82.1±1.9)%、(15.7±0.5)%]比较差异有显著性(P＜0.01).②动物实验:125I-ASODNs治疗组小鼠肿瘤体积(mm3) (76.1±22.9)减小,Ki-67表达率[(20.8±1.0)%]下降,Ki-67蛋白量[ (58.6±2.9)%]降低,肿瘤细胞凋亡率[(24.9±2.0)%]升高,与ASODNs治疗组[(185.7±37.7)、(29.2±1)% 、(79.7±3.4)% 、(17.8±1.9)%]比较差异有显著性(P＜0.01).结论 Ki67基因放射性核素反义治疗较单纯反义治疗具有更强的阻抑肾癌细胞Ki67基因表达、抑制增殖、促进凋亡作用.