人非小细胞肺癌微血管内皮细胞原代培养方法改进

摘要

目的 探索人非小细胞肺癌血管内皮细胞(HNSCLC-MECs)的培养方法,观察细胞生长状态并鉴定.方法 收集外科非小细胞肺癌手术组织标本,研磨至匀浆经钢筛网过滤收集沉淀,短时少量胰酶消化后组织块贴服培养.根据细胞差速粘附的原理对细胞进行纯化和传代.结果 原代培养60 h后可见少量细胞贴壁生长,7d后贴壁细胞明显增多,传代后10 d单层细胞呈典型“铺路石”样改变.应用激光共聚焦显微镜可见FactorⅧ及CD34抗体表达于细胞膜上,表达阳性率＞95％.结论 应用筛网法、贴壁法和少量胰酶法可以获得大量生长良好的HNSCLC-MECs,经鉴定符合血管内皮细胞特性.