改良的原代心肌细胞培养方法

摘要

目的：探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞.方法：无菌条件下取3日内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用Ⅰ型胶原酶短时多次消化,然后应用差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞.对心肌细胞进行形态学观察、存活率检测和免疫荧光鉴定.结果：台盼蓝染色检测心肌细胞存活率在95％以上.培养24小时后的心肌细胞已贴壁生长,呈梭形及多边形,有自发性搏动,48小时后细胞伪足相互交织成网,进而形成细胞簇,呈现同步性搏动.免疫荧光鉴定心肌细胞纯度达96％.结论：此种方法能够可靠地获得较高存活率和纯度的原代乳鼠心肌细胞.