柱前衍生HPLC-UV法测定类风湿性关节炎大鼠尿样中16种氨基酸含量

摘要

目的 建立柱前衍生-高效液相色谱-紫外分光光度(柱前衍生-HPLC-UV)测定类风湿性关节炎大鼠尿样中16种氨基酸含量的方法.方法 将大鼠尿样样品与异硫氰酸苯酯(PITC)衍生,衍生样品采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱进行分离,以乙腈-甲醇-水(6∶2∶2)和醋酸钠缓冲液为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,进样量10 μL.结果 16种氨基酸在线性范围内线性关系良好,相对回收率均在85％～115％,日内RSD均＜15％,检出限在3.1～45.3 ng/mL范围内.16种氨基酸在大鼠尿液中的含量在2.164～565.966 μg/mL范围内.结论 本方法操作简便、灵敏度高,适合于类风湿性关节炎大鼠尿样中氨基酸的含量测定.