新型沃顿胶硫酸软骨素复合支架体外构建组织工程软骨的实验研究

摘要

目的 以脐带中的沃顿胶为原料,复合硫酸软骨素制备新型复合支架,检测该支架的性能,并与分离的人脐带间充质干细胞共培养,构建组织工程软骨.方法 分离脐带,去除被膜及血管,得到沃顿胶,采用Ⅱ型胶原酶消化法获得人脐带间充质干细胞,通过流式细胞仪鉴定;以沃顿胶为原料,通过机机械粉碎、差速离心法、反复冻融去细胞,真空冷冻干燥成型、物理及化学交联的方法制备出三维支架,通过电镜观察支架结构,检测物理性能,与获得的间充质干细胞共培养诱导为组织工程软骨,通过组织化学染色及免疫组织化学的方法进行检测成分.结果 分离的人脐带间充质干细胞CD44、CD90表达阳性,CD34表达阴性.制备出的沃顿胶硫酸软骨素复合支架具有三维立体取向结构,孔隙率达到90％以上,符合软骨组织工程支架要求,且富含糖胺多糖及Ⅱ型胶原,将人脐带间充质干细胞复合到支架上,经诱导培养生成软骨样物质,甲苯胺蓝染色阳性.结论 从脐带沃顿胶分离出人脐带间充质干细胞,制备的复合支架为三维多孔结构,物理性能符合软骨组织工程支架要求,具有良好的生物相容性,在支架上接种脐带间充质干细胞后,生长较好,并可促使其成软骨分化.为软骨组织工程支架材料的选择提供了新的思路.