摘要:
硫酸软骨素是体内一种具有丰富生物学活性的糖胺聚糖(GAGs),生物活性表现在促进神经元成熟,抑制神经细胞轴突再生,抑制血管再生,介导细胞间相互作用等.研究表明,硫酸软骨素不同的硫酸化修饰(位点,数量)将极大地影响其所表现的生物学功能,而硫酸软骨素的天然提取物常为多种硫酸化位点的硫酸软骨素的混合物,利用其所得出的生物学结论重现性差,构效关系不具有明确的说服力.利用化学合成获得结构明确,均一的硫酸软骨素及其缀合物是研究相关构效关系的必要手段.牛睾丸来源的透明质酸酶(Hyaluronidase from Bovine Testicular,BTH)可选择性水解透明质酸的GlcNAcp(l,3)GlcA苷键,最终得到透明质酸四糖(GlcA-GlcNAc-GlcA-GlcNAc).该酶价格便宜,来源丰富,基于其较好的可获得性,课题组发展了一种以天然存在的且廉价易得的高分子透明质酸为原料,通过透明质酸酶降解,再经简单的保护基操作,羟基翻转以及硫酸化和脱保护得到硫酸软骨素及其相关官能团衍生物以及缀合物的合成方法.此合成策略可直接利用透明质酸酶降解天然来源透明质酸从而得到百克级的透明质酸四糖,收率中等.以此四糖为原料,经过简单的保护基转换可在不需糖基化的前提下得到硫酸软骨素-A,C,E四糖以及2位氨基的酰基衍生物以及糖簇分子,路线全长14-16步,总收率3%左右,所合成产物可达克级规模,远远优于近期文献所报道的以单糖为原料的硫酸软骨素四糖合成收率(21步,收率低于1%).基于课题所采用的合成路线及已达到的反应规模,可容易的得到具有丰富结构多样性的硫酸软骨素寡糖及缀合物分子库,用以研究与硫酸软骨素相关的体内重要的生物学功能.