人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定

杨芳; 何援利; 姜孝玉; 刘芸; 彭冬先; 宗利丽

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人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定

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目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白.方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素编码区基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆入pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α进行表达、纯化及活性测定.结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性.结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础.

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来源
《南方医科大学学报》|2005年第4期|416-418|共3页
作者
杨芳; 何援利; 姜孝玉; 刘芸; 彭冬先; 宗利丽;
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作者单位

南方医科大学珠江医院妇产科,广东,广州,510282;

南方医科大学珠江医院妇产科,广东,广州,510282;

中山大学生命科学院医药分子生物学实验室,广东,广州,510275;

中山大学生命科学院医药分子生物学实验室,广东,广州,510275;

南方医科大学珠江医院妇产科,广东,广州,510282;

南方医科大学珠江医院妇产科,广东,广州,510282;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
人内皮抑素; 基因克隆; 表达; 纯化; 抗血管生成作用;

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