水牛垂体催乳素cDNA的克隆与序列分析

摘要

根据GenBank中报道的几种哺乳动物催乳素(PRL)基因序列,设计1对特异性引物.从广西本地水牛脑垂体中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增水牛PRL cDNA全序列,并连接到pMDl8-T载体,经PCR和酶切鉴定的阳性克隆进行测序,测定结果表明:该cDNA开放阅读框(ORF),长度为690bp,编码氨基酸为229个,其中前19个氨基酸为信号肽.用NCBI上的Blast功能将测序结果同GenBank发表的序列进行比对,具有很高的同源性,其中与牛属动物间源性最高,达98.4%,证明所克隆的序列为水牛PRL cDNA全序列,已提交到GenBank(登陆号:EF054878).本研究成功克隆水牛PRL cDNA全序列,为下一步构建原核表达载体、表达体外蛋白,以及进一步研究其生物学功能奠定了基础.