水牛

摘要： 为了筛选治疗水牛犊腹泻的敏感药物。本试验采集20头水牛犊的腹泻粪便,通过革兰氏染色后进行显微镜观察,然后分离培养并进行药敏试验。结果表明:病原菌大部分为革兰氏阴性杆菌,腹泻细菌对氧氟沙星和左氟沙星最敏感。此结果可供临床用药参考。

摘要： 旨在鉴定非编码RNA circNMT1,明确其组织和细胞的表达模式,以及探究过表达circNMT1对脂肪细胞分化的影响。本试验以30月龄中国沼泽水牛(信阳水牛,n=3)的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部皮下脂肪组织和前体脂肪细胞以及3T3-L1细胞为试验材料。通过半定量PCR和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)技术对circNMT1进行鉴定、细胞定位并明确其时空表达模式。进一步分别将其过表达到3T3-L1和水牛前体脂肪细胞中,利用形态学方法及定量方法检测过表达后脂滴累积情况,同时采用qRT-PCR检测脂肪标志基因相对表达水平的变化。结果表明,circNMT1是真实存在且稳定表达的circRNA,在水牛前体脂肪细胞的细胞核和细胞质中均表达,且在脂肪组织和成熟的脂肪细胞中高表达(P<0.001)。功能获得性试验表明,在3T3-L1细胞和水牛脂肪细胞,circNMT1显著促进脂肪细胞的脂滴积累,并且显著提高成脂标志基因PPARG、C/EBPα和FABP4的相对表达水平(P<0.01)。circNMT1可能是水牛脂肪细胞分化的正调控因子,这为circNMT1在水牛脂肪细胞中的调节作用提供了新见解。

摘要： 5月的一个清晨,数百头水牛集结在嘉陵江边一道栅栏门后。8时30分,栅栏门开启,水牛们争先恐后地跳进嘉陵江中,浩浩荡荡地游向江中绿岛。这是位于四川南充蓬安县油坊沟社区的一道奇观。每年暮春至初秋,水草茂盛的时节,上百头水牛便会日出渡江上岛,日落涉水归栏。

摘要： 笔者对水牛配种受胎率低、返情现象严重进行了调查和技术攻关,取得了一定的效果,现将试验过程和结果报道如下。一、材料与方法1.使用药物。甲硝唑氯化钠注射液,四川美大康华康药业有限公司(国药准字H51021418),批号17050715,规格:甲硝唑0.5克,氯化钠0.8克;头孢拉定,华北制药河北华民药业有限责任公司(国药准字H13020661),批号15060705。

摘要： 水牛为全世界约20亿人提供乳、肉等产品,在人类生活中占据重要位置,然而水牛的遗传信息未得到充分挖掘。本文对水牛重要经济性状、水牛高质量参考基因组构建、进化历史、全基因组关联分析和重要经济性状关联基因发掘的研究进展进行综述,并对优化建立水牛全基因组选择育种和基因组设计育种为人类培育出产奶量高、个体大、性格温顺、抗热应激且耐粗饲的理想水牛新品种进行了展望,为实现水牛基因组选择育种提供参考。

摘要： 烈日炎炎,大水牛正尽情地泡在一条大河流里。忽然,"扑棱棱"一声响,河边树上飞下来一只阳雀。"嗨,你好啊,水牛大哥。"阳雀热情地跟水牛打招呼。"你来这里做什么?"水牛抬起头问阳雀。"喝水啊。"阳雀回答。听到这话,水牛立刻"嚯嚯"地笑起来:"你那么大点,还用得着到这么大的河流来喝水吗?随便找几滴不就得了吗?"

摘要： 试验通过生物信息学技术对信号转导和转录激活子(signal transducer and activators of transcription,STATs)基因家族进行了motif、基因结构分析、共线性分析、不同物种系统进化分析和表达量分析,旨在挖掘水牛STAT基因家族的功能。结果表明,水牛STAT基因家族共有7个家族成员并分别命名为bbu.STAT1~6,其中bbu.STAT5分为bbu.STAT5A和bbu.STAT5B。bbu.STAT1和bbu.STAT4位于2号染色体,bbu.STAT2和bbu.STAT6位于4号染色体,bbu.STAT3、bbu.STAT5A和bbu.STAT5B位于3号染色体。这7个STAT蛋白长度在748~865 aa之间,等电点PI均小于7,说明水牛STAT蛋白均属于酸性蛋白质。基因结构分析发现不同的组具有不同的内含子数模式。Motif分析发现,除bbu.STAT2外,均含有预测出的motif 1~10且排序相同,说明水牛STAT基因家族成员蛋白功能相似。共线性分析结果显示,水牛和奶牛中均存在3对相同成员的STAT基因表现出串联重复且没有发现片段重复,推测串联复制在水牛和奶牛STAT家族的扩增中起着主导作用。发现2个水牛STAT基因对的Ka/Ks值小于0.5,且STAT5A-STAT5B小于0.1,说明该基因对具有更强的纯化选择压力。不同物种STAT系统发育分析显示,STAT基因家族具有较高的保守性,其中水牛与奶牛和牦牛的聚类更为相近。表达量分析发现所有STAT基因在乳腺组织中均有表达,其中STAT5A的表达量最高,STAT4的表达量最低,推测水牛STAT基因家族参与调控乳房发育及泌乳过程,其中STAT5A可能起更重要的作用。

摘要： 在畜牧生产中,繁殖性状是一个非常重要的经济性状,繁殖性能的高低与动物生产效益密切相关。水牛是我国南方重要的物种资源,它具有耐粗饲、适应性强和易饲养等特点。而且水牛肉肉质鲜美,易于消化;水牛奶更是营养丰富全面,是制作高档奶制品的优质原料,一直以来,深受广大消费者青睐。然而,尽管我国水牛存栏量多,但水牛繁殖力低,一直是制约水牛产业发展的重要因素。如何提高水牛繁殖性能已成为当下研究的重点。为此,本文主要从分子水平上对近年来水牛繁殖性状相关基因的研究进展做一概述,并展望其应用前景。

摘要： 介绍了1例初期症状不明显,仅表现为不食料的水牛诊治情况。水牛不食料的原因较多,有些病牛前期表现不明显,综合病牛行为和环境等因素,进行了初步诊断给药,并给予密切关注,随后根据病牛后期表现出来的症状,确诊为瘤胃积食症,对治疗方式进行改良,病牛恢复健康。

摘要： 创伤性网胃炎,曾称“铁器病”“铁丝病”,或称“创伤性消化不良”,是一种由金属异物或较为坚硬细长竹木细棍子进入网胃后,由于网胃的蠕动而刺伤或刺穿网胃壁而导致网胃和腹膜损伤及引发炎症。又因这些异物的不断刺伤网胃引发创伤性网胃炎,还可能因异物刺穿网胃壁厚再刺穿膈肌,引发创伤性心包炎等疾病。

摘要： 水牛是中国南方地区重要畜种资源之一.长期以来,水牛主要作为役用,为推动中国农业生产力的发展作出了巨大贡献.随着中国机械化程度的发展,水牛已经从役用型逐渐转向肉用、乳用及乳肉兼用型方向发展.中国南方地区气候条件大都以高湿热气候为主,环境高温是对生活在热带和亚热带地区水牛生产力的主要约束因素.已有报道多以基于奶牛的生理反应所建立起来的各种温湿指数(THI)判断动物是否处于热应激状态.由于奶牛与水牛生理特性存在一定差异,各地气候条件以及饲养环境不相同,如何建立适合本地区气候条件的水牛舒适条件评价指数目前仍有待进一步研究.已有研究表明,热应激通过降低水牛采食量进而降低水牛的生长性能,对于泌乳牛而言,采食量的降低意味着产奶量会不足;当环境温度过高时,水牛更易产生繁殖障碍,如沉默发情,卵泡发育不良,激素分泌失调等;同时在夏季高温情况下,水牛免疫机能也会降低.夏季水牛甲状腺素浓度降低,血液皮质醇浓度会升高,引起应激反应.热应激情况下,水牛卵母细胞蛋白质合成减少,损害mRNA合成,引起细胞凋亡.同时夏季高温情况下,水牛体内抗氧化酶活性增加,表明高温环境会引发水牛氧化应激反应.热应激还会增加血浆催乳素浓度,引发免疫细胞损伤和炎症反应增强,进而造成免疫应激.奶牛试验研究多以非交替的持续性温度条件为模型,不能完全贴合生产中的温度变化状况,实际生产中温度变化对水牛生产的影响有待于进一步的细致研究.本文主要综述了水牛适宜生长环境条件、热应激评价、热应激征兆、热应激的影响以及热应激适应机制等方面的研究进展,以更好的评价温热环境因素对水牛生产及健康的影响,促进水牛产业的健康可持续发展.

摘要： 抗缪勒氏管激素(AMH)在雄性性腺分化中起着重要作用.性别决定基因SRY能够通过两个途径诱导哺乳动物睾丸中的SOX9表达.SRY结合SOX9上的睾丸特异性增强子(TESCO)与SF1协同来激活SOX9的转录;SRY也可上调ER71的表达,然后通过ER71激活SOX9的转录.在睾丸分化开始时,SOX9和SF1能够结合在AMH的启动子上,从而增强AMH的表达.雄性分化机制在人类、小鼠和大鼠中均有研究,但在水牛上面目前还没有雄性分化机制的相关报道.有研究表明,AMH能够使雌雄双生中的雌犊牛发生雄性化,本文的目的是根据已有的哺乳动物雄性分化机制中的决定基因,将这些基因与水牛进行比对,从而预测水牛的雄性分化机制.

摘要： Smad4是Smad蛋白家族中的重要成员,在TGF-β/Smad的细胞信号转到中起着关键作用,为了阐明Smad4基因对水牛卵巢颗粒细胞增殖及胚胎发育的分子机制,本试验采用RT-PCR技术,克隆水牛Smad4基因,并对其核苷酸序列和蛋白质序列进行生物信息学分析,并构建Smad4基因的真核表达载体,并通过脂质体转染法转染体外培养的牛卵巢颗粒细胞.结果表明:克隆得到水牛Smad4基因编码序列,编码区全长为1662bp,编码553个氨基酸.通过BLAST对水牛Smad4基因的核苷酸序列进行同源性比较,结果显示水牛Smad4基因的与牛的同源性为99％,与绵羊、猪、马、人的同源性分别为:98％、96％、96％和95％,系统进化树分析表明Smad4基因在不同物种的进化过程中具有高度的保守型,试验成功构建了水牛Smad4基因的真核表达载体pEGFP-N1-Smad4.本研究成功克隆了水牛Smad4基因,并成功构建了Smad4基因的真核表达载体,为进一步研究Smad4基因在水牛胚胎发育过程中的分子机制奠定了理论基础.

摘要： 采集鄂州市某规模化水牛养殖场人工授精后0d、14d、18d、20d、23d和28d的水牛血液样本,利用化学发光仪和全自动五分类血细胞分析仪对血液中孕酮和常规血液生化指标进行检测.根据孕酮检测结果,将试验牛分为孕酮含量未发生变化组(A组)和孕酮含量发生变化组(B组),用SPSS19.0软件对数据进行T检验和相关性分析.结果显示A、B两组白细胞、淋巴细胞绝对值、单核细胞绝对值以及嗜碱性粒细胞绝对值显著上升(P≤0.05),嗜中性粒细胞绝对值显著下降(P≤0.05);A、B两组嗜酸性粒细胞绝对值与外周血孕酮含量变化呈显著负相关(P≤0.05).实验结果表明,无论妊娠失败水牛血清中孕酮含量是否发生显著变化,其在人工授精后早期嗜中性粒细胞绝对值均显著降低,但其变化幅度不大;白细胞含量显著上升主要由于淋巴细胞以及嗜碱性粒细胞绝对值增加所导致.

摘要： 水牛是全球第二大产奶家畜,水牛奶营养丰富,但产奶量较低,缺乏专门化乳用品种.水牛的产奶性状主要包括泌乳量、乳脂量、乳蛋白量、乳脂率和乳蛋白率等,是由多基因控制的数量性状,与水牛的经济价值直接相关.筛选和应用与水牛产奶性状相关的分子遗传标记,进而提高水牛的产奶量以及改善水牛的泌乳性能,具有重要的现实意义.数量性状基因位点(Quantitative Trait Loci,QTL)定位是分子遗传标记辅助选择的关键步骤,定位的方式有两种,即候选基因法和全基因组扫描法.

摘要： 动物大多数性状属于数量性状,而水牛的产奶性状更是一个复杂的的数量性状.针对一个靶基因进行调控,很难达到调控产奶量和奶品质的目的.本研究针对水牛基因组rDNA位点采用CRISPR/Cas9技术,探索多基因编辑实现水牛产奶性状相关基因PRL、DGAT1、CSN1S1基因的定点整合.

摘要： 为研究水牛PRKAA2基因第四外显子多态性,本研究以广西水牛研究所的摩拉水牛和尼里拉菲水牛为材料,扩增其PRKAA2基因第四外显子,并通过常规测序法检测其SNPs.经测序发现,在实验所扩增的目的片段内包含有PRKAA2第三内含子部分序列,且在此部分序列内存在3个SNP位点(IVS3.557T＞C,IVS3.560C＞T,IVS3.565G＞A).而在PRKAA2第四外显子内存在1个SNP位点(c.462G＞A).经遗传多样性分析后表明在水牛PRKAA2第三内含子及第四外显子的多态较为丰富.

摘要： 目的：为了阐明水牛ELF5基因的结构、基因与水牛泌乳的相关性以及牛科物种ELF5基因的序列差异和群体遗传特征. 方法：本研究采用RT-PCR和电子克隆技术水牛ELF5基因进行了分离鉴定和组织表达谱分析,运用PCR-SSCp技术与DNA直接测序的方法对91份水牛、普通牛、牦牛和大额牛样品ELF5基因的编码区序列进行群体变异检测. 结果：水牛ELF5基因的CDS为768bp,编码255个氨基酸,各物种间的ELF5蛋白的氨基酸序列同源度较高;在水牛非泌乳期和泌乳期间,ELF5基因主要在水牛乳腺、胃、肺、脾、心和肝中表达,其在乳腺组织的表达量最高,且泌乳期的表达量是非泌乳期的1.8倍;在水牛ELF5基因的编码区共检测到11个SNp位点,其中SNP255和SNP461分别在河流型和沼泽型水牛中纯合,其他9个SNp为河流型和沼泽型水牛共享,SNP460和SNP461导致p.G154S和p.G154n氨基酸的异义替换,但对其蛋白功能无显著影响. 结论：研究结果提示,水牛ELF5基因在乳腺发育、生长及其泌乳活动中承担重要角色,ELF5蛋白在牛科物种间高度保守性,预示着水牛ELF5基因在生物体的发育和分化中可能承担着重要的功能.

摘要： 为了进一步建立蛋白诱导水牛iPS细胞体系,本试验对穿膜肽TAT与标记蛋白EGFp进行了融合表达,同时引入核定位NLS序列,获得纯化蛋白后进行细胞共培养试验,以探讨穿膜肽TAT对携带水牛干细胞转录因子纯化蛋白进入细胞内的效果.首先通过PCR扩增、TA克隆、双酶切以及T4连接等步骤构建原核表达载体pET-EGFp和pET-NLS-EGFP-TAT;再将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达;然后用HisTrapHp层析柱纯化融合蛋白,经复性、透析和浓缩后,最后将纯化的EGFp蛋白和NLS-EGFP-TAT蛋白分别添加到水牛成纤维细胞中共培养.结果表明,成功表达了融合蛋白EGFP(47.3kDa)和NLS-EGFP-TAT(50.1kDa);纯化蛋白与水牛成纤维细胞共培养5-8h后,EGFp蛋白不能进入细胞内,而NLS-EGFP-TAT蛋白在穿膜肽TAT的帮助下能够顺利进入细胞内,但未能显著定位到细胞核内.

摘要： 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤匍胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三纳还原法制备颗拉大小为30nm肢体金,再用胶体盒标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫兔疫检测试纸条.经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫VSG抗原均无交叉反应,特异性较好.采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62％.结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测检测大片形吸虫.

摘要： 本发明公开了一种水牛奶特征肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO1所示；利用水牛奶特征肽鉴定水牛奶的方法，包括：在待测物中加入蛋白质沉淀剂，超声、离心，取上清液超滤，得到分子量小于10KDa的超滤液，对超滤液进行脱盐处理，得到脱盐溶液，对脱盐溶液进行液质分析，采集多肽指纹图谱；判断多肽指纹图谱是否含有水牛奶特征肽的离子信号；若多肽指纹图谱含有水牛奶特征肽的离子信号，则测定待测物中水牛奶特征肽的峰面积，记为X；测定与待测物同重量份数的纯水牛奶中水牛奶特征肽的峰面积，记为Y，则待测物中含有的纯水牛奶比例为Y与X的比值。本发明可检测出待测物中水牛奶的比例，使用方便、快捷。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种从水牛乳汁中分离培养水牛乳腺上皮细胞的方法，本发明的方法主要包括(1)收集水牛乳汁、(2)分离水牛乳汁和(3)水牛乳腺上皮细胞培养和纯化几个步骤来完成，本发明分离水牛乳腺上皮细胞的材料为水牛乳汁，采集方式为人工挤奶，取材方便，经济便捷，通过合理配置培养液、合理操作能高效的分离水牛的乳腺上皮细胞，减少细胞损伤；同时，在培养基中添加非必需氨基酸和抗氧化剂，非必需氨基酸能够促进水牛乳腺上皮细胞的增殖，抗氧化剂能够提高乳腺上皮细胞抗氧化酶活性，增强了细胞的抗氧化能力，从而促进细胞生长，提高细胞活力。

摘要： 本发明提供了一种水牛特异性引物、试剂盒及其在水牛源性成分鉴定中的应用，属于动物种源性成分分子检测技术领域。本发明中，水牛特异性引物是能特异扩增SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或该序列的特异性片段的引物对SEQ ID No.2&3。本发明试剂盒包括所述水牛特异性引物、反应试剂以及阳性和空白对照。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品中是否含有水牛源性成分。本发明为肉制品、皮张和饲料中水牛源性成分的检测提供了有效、精准、可靠的手段，具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。

摘要： 本发明涉及一种水牛角浓缩粉颗粒的制备方法，包括以下步骤：手工用锯子将水牛角的角尖和角桩分开，角桩镑片，经水提煎液浓缩，收膏待用；角尖镑成薄片，60°C干燥，置万能粉碎机粉碎成细粉，将其与上述清膏混匀，80°C干燥，将混合物用超微粉碎机粉碎得到水分含量4.6％，有效成分含量15.3％的水牛角浓缩粉。

摘要： 本发明公开了一种水牛奶特征肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO1所示；利用水牛奶特征肽鉴定水牛奶的方法，包括：在待测物中加入蛋白质沉淀剂，超声、离心，取上清液超滤，得到分子量小于10KDa的超滤液，对超滤液进行脱盐处理，得到脱盐溶液，对脱盐溶液进行液质分析，采集多肽指纹图谱；判断多肽指纹图谱是否含有水牛奶特征肽的离子信号；若多肽指纹图谱含有水牛奶特征肽的离子信号，则测定待测物中水牛奶特征肽的峰面积，记为X；测定与待测物同重量份数的纯水牛奶中水牛奶特征肽的峰面积，记为Y，则待测物中含有的纯水牛奶比例为Y与X的比值。本发明可检测出待测物中水牛奶的比例，使用方便、快捷。

摘要： 本发明公开了一种水牛源LIF的制备方法，以CHO‑K1作为宿主细胞来生产水牛源LIF细胞因子，先构建PB‑LIF‑Pola载体，然后将PB‑LIF‑Pola载体与Hypbase共转到CHO‑K1细胞，并在0‑6μg/ml Puro浓度下进行加压约20d左右，之后进行扩大培养，冻存。研究表明，建系后的CHO‑K1细胞能够成功表达水牛源LIF基因并分泌水牛源LIF生长因子。据此，发明人研制了水牛精原干细胞条件培养液，发现培养液中仅需加入较低水平的水牛源LIF即可达到较高浓度鼠源LIF在维持体外水牛精原干细胞特性的效果。因此，本发明可解决水牛精原干细胞体外培养中加入其它物种LIF生长因子成本较高的问题，而且初步建立了以水牛源LIF为关键的条件培养液优化水牛SSCs体外系统。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种从水牛乳汁中分离培养水牛乳腺上皮细胞的方法，本发明的方法主要包括(1)收集水牛乳汁、(2)分离水牛乳汁和(3)水牛乳腺上皮细胞培养和纯化几个步骤来完成，本发明分离水牛乳腺上皮细胞的材料为水牛乳汁，采集方式为人工挤奶，取材方便，经济便捷，通过合理配置培养液、合理操作能高效的分离水牛的乳腺上皮细胞，减少细胞损伤；同时，在培养基中添加非必需氨基酸和抗氧化剂，非必需氨基酸能够促进水牛乳腺上皮细胞的增殖，抗氧化剂能够提高乳腺上皮细胞抗氧化酶活性，增强了细胞的抗氧化能力，从而促进细胞生长，提高细胞活力。

摘要： 本发明提供了一种水牛特异性引物、试剂盒及其在水牛源性成分鉴定中的应用，属于动物种源性成分分子检测技术领域。本发明中，水牛特异性引物是能特异扩增SEQ？ID？No.1所示的核苷酸序列或该序列的特异性片段的引物对SEQ？ID？No.2&3。本发明试剂盒包括所述水牛特异性引物、反应试剂以及阳性和空白对照。采用本发明的引物扩增样品DNA，对PCR扩增产物进行分析，可判定样品中是否含有水牛源性成分。本发明为肉制品、皮张和饲料中水牛源性成分的检测提供了有效、精准、可靠的手段，具有简便、快速、全面、特异性强的特点，且成本较低，适用性广。

摘要： 本发明涉及一种水牛角浓缩粉颗粒的制备方法，包括以下步骤：手工用锯子将水牛角的角尖和角桩分开，角桩镑片，经水提煎液浓缩，收膏待用；角尖镑成薄片，60°C干燥，置万能粉碎机粉碎成细粉，将其与上述清膏混匀，80°C干燥，将混合物用超微粉碎机粉碎得到水分含量4.6％，有效成分含量15.3％的水牛角浓缩粉。

摘要： 本发明公开了一种提高水牛奶共轭亚油酸含量的奶水牛饲养方法。本发明通过改善奶水牛饲养方法来得高水牛奶中CLA含量。与其他方法不同的是，本发明不仅优化了饲料配方，还通过添加生理活性物质改变了水牛乳合成脂肪的代谢过程，最终生产出富含共轭亚油酸的水牛奶。采用本发明方法饲料的奶牛所生产的水牛奶，不仅富含(9c，11t)-CLA，而且富含(10t，12c)-CLA，并且在其他营养成分不变的情况下乳脂含量明显下降，具有显著的应用价值。