DJ-1调控AMPK/mTOR信号在恢复糖尿病心肌对缺血后处理敏感性中的作用

摘要

目的 探讨DJ-1调控的AMPK/mTOR信号在恢复糖尿病心肌对缺血后处理(IPO)敏感性中的作用.方法 8周龄雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,制备1型糖尿病模型.60只糖尿病大鼠随机分为5组(n=12):心肌缺血再灌注组(IR),缺血后处理组(IPO),DJ-1过表达+IR组(DIR),DJ-1过表达+IPO组(DIPO),DJ-1过表达+IPO+AMPK抑制剂复合物C组(DIPOC).采用结扎左前降支30 min,再灌注120 min的方法建立心肌IR模型;IPO组和DIPO组于再灌注前行3个循环的灌注10 s/缺血10 s.分别通过尾静脉注射腺相关病毒载体(rAAV9-CMV-DJ-1)和复合物C过表达DJ-1和抑制AMPK.再灌注120 min检测心梗面积,血清CK-MB量,心肌DJ-1、AMPK/mTOR表达和LC3Ⅱ/Ⅰ值.结果 与IR组比较,IPO组心梗面积、CK-MB、DJ-1、磷酸化mTOR、磷酸化AMPK及LC3Ⅱ/Ⅰ均无显著变化(均P>0.05),而DIPO组心梗面积[(52.57±5.00)％vs(32.92±6.09)％]、CK-MB[(1683.02±258.12)U/L vs(879.60±195.70)U/L]、磷酸化mTOR(1.00±0.00 vs 0.56±0.10)均显著下降(均P<0.05),DJ-1(1.00±0.00 vs 3.17±0.36)、磷酸化AMPK(1.00±0.00 vs 2.19±0.37)和LC3Ⅱ/Ⅰ(1.00±0.00 vs 1.26±0.20)显著增加(均P<0.05).与DIPO组相比,DIPOC组心梗面积及CK-MB水平增加,磷酸化AMPK及LC3Ⅱ/Ⅰ表达下降,磷酸化mTOR水平增加(均P<0.05).结论 过表达DJ-1可恢复IPO对糖尿病心肌的保护作用,其机制可能与AMPK/mTOR信号激活及其下游的自噬上调相关.