导向激光捕获显微切割纯化的贲门腺癌细胞蛋白质表达图谱的建立

摘要

目的 建立高分辨率的贲门腺癌细胞双向凝胶电泳图谱,为构建贲门腺癌的蛋白质表达数据库奠定基础. 方法 应用导向激光捕获显微切割技术(NLCM)获取贲门腺癌细胞,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术对贲门腺癌细胞蛋白进行分析,建立贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱,并通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱肽质量指纹技术(MALDI-TOF MS)和数据库对部分蛋白质点进行鉴定. 结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的NLCM分离的贲门腺癌细胞双向凝胶电泳图谱;鉴定出了72个贲门腺癌相关蛋白质;蛋白质大部分位于细胞质和线粒体,其次位于细胞膜、细胞核、细胞骨架、内质网、高尔基体、核糖体等.蛋白质涉及细胞代谢、增殖和分化、RNA转录和翻译、信号转导、氧化还原、蛋白质分子伴侣等. 结论 首次建立了分辨率高、重复性好的导向激光捕获显微切割分离的贲门腺癌细胞的双向凝胶电泳图谱,并鉴定出了72个贲门腺癌相关蛋白,为进一步构建贲门腺癌的蛋白质组学数据库奠定了基础.