脐带间充质干细胞对早产大鼠支气管肺发育不良肺组织DNA甲基化的影响

摘要

目的探讨脐带间充质干细胞(U-MSCs)对早产大鼠支气管肺发育不良(BPD)肺组织DNA甲基化的影响。方法提取U-MSCs进行培养,并行表型鉴定与三系分化能力检测。将早产大鼠随机分为BPD建模组(含体积分数0.95氧处理)和对照组(C组,含体积分数0.21氧处理)。处理9 d后将BPD建模组大鼠随机分为PBS治疗组(A组)和U-MSCs治疗组(B组),正常空气中的大鼠作为C组。A组每只大鼠通过尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)100μL,B组每只大鼠通过尾静脉注射含2×108个U-MSCs的悬液100μL,C组每只大鼠通过尾静脉注射PBS 100μL,每隔3 d注射1次,共注射2次。治疗8 d以后收集A、B、C组的肺组织进行DNA甲基化的检测。结果提取的U-MSCs高度表达U-MSCs表面标记物CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD166,而不表达CD31、CD45和HLA-DR,并且具有成骨、成脂和成软骨的能力。B组大鼠生长发育水平和活动度明显高于A组,肺组织损伤程度和炎细胞浸润水平显著低于A组。与C组相比较,A组中A1bg、Guca1b、Hoxa6、LOC500331、Alox12、Arid4b、Btnl8、Cldn18、Clstn1、Defb22、Gpatch11、Lep、Lsm4、Mboat7、Mgat5、Olr1689、Olr1707、Olr556、Psmb8、Rbm14、RGD1561039 DNA甲基化水平明显下降(F=24.98~1546.46,P<0.05),B组与A组相比,以上DNA的甲基化水平明显回升,差异有显著性(P<0.05);而B组与C组相比除Hoxa6、LOC500331 DNA甲基化水平下降外,其他基因的甲基化水平比较差异无显著性(P>0.05)。结论BPD模型中存在DNA甲基化情况。U-MSCs可能通过影响BPD肺组织DNA的甲基化水平影响疾病的发展。