纤维连接蛋白在卵巢癌多细胞团簇中的作用和顺铂对团簇的影响

摘要

目的:探讨纤维连接蛋白(FN)对卵巢癌多细胞团簇(MCA)的影响和涉及的整合素受体的调节作用,以及顺铂(DDP)对MCA的影响.方法:用液体重叠技术培养SKOV3和OVCAR-3两种卵巢癌细胞株,获得MCA后用不同浓度的FN进行干预,观察FN对MCA的作用并研究DDP对两种MCA的影响;运用流式细胞术和RT-PCR检测整合素受体α3β1、α4β1、α5β1的表达情况.裸鼠建立人卵巢癌腹水瘤模型后用FN及DDP进行干预,分析两者对裸鼠体内肿瘤和腹水形成的影响,进一步证实MCA形成的相关因素.结果:①培养SKOV3和OVCAR-3两种MCA的最佳FN浓度分别为10 μg/ml和20 μg/ml.②SKOV3的MCA和单层细胞DDP的半数抑制浓度(IC50)为20.29 μmol/L和29.80 μmol/L,OVCAR-3的MCA和单层细胞DDP的IC50为33.11 μmol/L和41.69 μmol/L;DDP处理前两种卵巢癌细胞株的单层细胞和MCA各细胞周期差异均有统计学意义(P＜0.05),DDP作用后MCA凋亡率均明显增加(P＜0.05).③流式细胞术、RT-PCR检测显示两种细胞主要表达α4β1 (P ＜0.05),MCA组各整合素均高于单层细胞组(P＜0.05).加入FN后,各整合素表达量均明显增加(P＜0.05).④裸鼠干预结果显示,FN组的肿瘤总数和腹水量均超过0.9％氯化纳液组和DDP组(P＜0.05),而DDP能有效抑制肿瘤生长和腹水形成(P＜0.05).结论:体外实验说明FN对卵巢癌MCA的形成有明显的促进作用,两种细胞株表面均有整合素受体α3β1、α4β1、α5β1的表达,以α4β1为主,FN可促进它们表达.动物实验证实FN对体内种植的肿瘤细胞也具有明显的促生长作用,而DDP能有效抑制肿瘤生长和腹水形成.