奥沙利铂联合地西他滨通过Wnt/β-Catenin信号通路抑制胃癌细胞作用的研究

摘要

目的分析奥沙利铂联合地西他滨抑制高分化胃癌细胞株MKN-28作用的主要机制及Wnt/β-Catenin信号转导通路的作用。方法体外常规培养胃癌MKN-28MKN45细胞,将细胞随机分为5组:对照组(DMSO)、奥沙利铂组(奥沙利铂10 mg/L)、地西他滨组(地西他滨20 mg/L)、奥沙利铂联合地西他滨组(奥沙利铂10 mg/L+地西他滨20 mg/L)、抑制剂XAV-939组(XAV-93910 mg/L)。MTT法分析各组胃癌细胞经处理后的增殖抑制作用,DAPI染色法分析各组细胞的凋亡,Western Blotting(WB)法和免疫细胞化学法分析Wnt/β-Catenin信号通路蛋白的变化。结果与对照组相比,奥沙利铂组、地西他滨组、联合组和XAV-939组在1、2和4 h的细胞抑制率明显升高,呈时间依赖性,且差异有统计学意义(P<0.05);同时与奥沙利铂组、地西他滨组和XAV-939组相比,联合组在1、2和4 h的细胞抑制率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);DAPI染色分析得出,与对照组细胞相比,其余4组细胞的凋亡小体数量明显增多,且联合组细胞的凋亡小体数量最多;WB法得出,与对照组相比,其余4组细胞的Wnt和β-Catenin蛋白水平明显降低(P<0.05),细胞浆内蛋白荧光强度减弱,且奥沙利铂联合地西他滨联合组细胞的上述蛋白表达降低最明显,细胞浆内蛋白荧光强度减弱也最明显(P<0.05)。结论奥沙利铂联合地西他滨能明显抑制胃癌细胞株MKN-28增殖并呈时间依赖性,可诱导细胞凋亡。其机制与抑制Wnt/β-Catenin信号通路Wnt和β-Catenin蛋白表达有关。