男性不育患者精浆中差异表达蛋白的筛选与鉴定

摘要

目的:初步探讨蛋白质组技术在精浆研究中的应用,建立男性少精、无精症患者及健康者精浆双向凝胶电泳图谱;筛查并鉴定三者间的差异表达蛋白质.方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)分离少精症、无精症患者和健康者精浆总蛋白,银染显色,ImageMaster 2D Elite软件分析,从中选取差异表达蛋白质,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质.结果:获得分辨率较好的精浆双向凝胶电泳图谱;得到5个在少精症、无精症忠者与健康者精浆中差异有显著性的蛋白质斑点,进行鉴定.结果表明这些特异蛋白分别为Serpin B6(Placental tlrlrorllbJ in inhibitor)(Cytoplasmic antiproteinase)(CAP)(P～otease inhibitor6)(PI-6)、Septin-1(LARP)(SeFOlogicauy defined breast cancer antigen NY-BR-24)、Kallikrein·6 precursor(Protease M)(Neur08in)(zyme) (SP59)、Hemoglobin beta chain、Beta-defensin 108 precursor(Beta-defenain 8)(DEFB-8).结论:在少精症、无精症患者与健康者精浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与少精、无精相关的精浆标志物.