食品动物源大肠杆菌耐药性分析及16S rRNA甲基化酶基因的检测

摘要

[目的]对四川地区临床分离的437株健康动物源及82株患病动物源大肠杆菌(E.coli)的耐药性及其机制进行研究,为临床合理用药提供理论依据.[方法]用3种氨基糖苷类药物和11种非氨基糖苷类药物对分离的大肠杆菌进行药物敏感性试验(K-B纸片法).选取至少耐1种氨基糖苷类药的大肠杆菌作为供试菌,通过PCR检测其16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE和npmA;对阳性菌株进行质粒接合试验;并用K-B纸片法分析临床菌和接合子对抗生素的敏感性.[结果]437株健康动物源和82株患病动物源大肠杆菌对14种抗菌药物表现出不同程度的耐药性.健康动物源大肠杆菌对氨苄西林、氯霉素、磺胺甲恶唑的耐药率较高,分别为69.79％,50.8％和68.72％,对庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星比较敏感,敏感率分别为75.97％,67.73％和97.02％;其中有134株分离菌至少对1种氨基糖苷类药物表现出耐药性.患病动物源大肠杆菌除对美罗培兰耐药率较低(为3.66％)外,对其余药物的耐药率在32.93％～100％,且都对至少1种氨基糖苷类药物表现出耐药性.多重耐药分析表明,健康动物源大肠杆菌主要分布于0～4耐,而患病动物源大肠杆菌至少耐7种抗菌药物,主要分布于10～14耐.在134株耐氨基糖苷类抗生素大肠杆菌中,检测到5株含rmtB基因,检测率为3.73％,未检测到armA、rmtA、rmtC、rmtD、rmtE和npmA基因.在82株患病动物源大肠杆菌中,检测到1株含armA基因,10株含rmtB基因,检出率分别为1.22％和12.2％,未检测到rmtA、rmtC、rmtD、rmtE及npmA基因;接合试验的耐药质粒传递率为100％,受体菌接合频率在(9.2×10 9)～(4.8×10-6).[结论]四川地区健康动物源大肠杆菌对抗生素呈中低水平耐药,多重耐药以4耐及以下为主,占63.84％,主要由rmtB基因引起;而患病动物源大肠杆菌对抗生素则呈高水平耐药,89.02％为10～14耐,主要由rmtB和armA基因引起.