非对称小干扰RNA沉默TACC2基因对结直肠癌增殖影响的研究

摘要

目的:本实验探讨靶向沉默TACC2基因的表达对人结直肠癌LoVo细胞增殖的影响及其主要机制.方法:采用Western blot检测结直肠癌组织、癌旁正常组织和人结直肠癌细胞系LoVo、HCT116及SW480细胞中TACC2蛋白的表达.设计针对TACC2基因的siRNA,阴性对照siRNA-NC及三条长短不同的非对称小干扰RNA[aiRNA(17/24),aiRNA(18/24)及aiRNA(19/24)].PCR检测各组对TACC2基因的沉默效果.MTT法检测siRNA,siRNA-NC和aiRNA(17/24)各组细胞增殖能力,流式细胞仪分别检测3组细胞周期的变化.结果:TACC2在结直肠癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织.人结直肠癌细胞系LoVo中TACC2蛋白的表达明显高于HCT116和SW480细胞系.aiRNA(17/24)在各组中有最强的基因沉默效果.与siRNA和siRNA-NC组相比,aiRNA(17/24)组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),处于细胞周期G2/M期的细胞数量明显增多(P<0.05).结论:基于TACC2基因的特异性非对称RNA干扰在沉默效率上优于传统siRNA,TACC2可能是治疗结直肠癌的一个重要靶点.