柠檬苦素抑制胃癌细胞转移的作用及机制研究

摘要

目的 探究柠檬苦素(Limonin)抑制胃癌细胞转移的作用及机制.方法 首先,对胃癌细胞(BGC-823、SGC-7901、AGS、MGC-803)进行体外培养.随后,利用细胞增殖实验(MTS)检测柠檬苦素(0、180、260、340、420、500μmol·L-1)对胃癌细胞增殖的影响;利用划痕愈合实验研究柠檬苦素(0、40、60μmol·L-1)对胃癌细胞迁移能力的影响.进而建立裸鼠胃癌细胞BGC-823腹腔种植转移模型,给予柠檬苦素[0、12.5、25 mg·(kg·d)-1]腹腔注射治疗28 d后,检测其对胃癌转移的抑制作用.最后,利用Western blot初步研究柠檬苦素与信号转导和转录因子(STAT3)信号通路之间的关系.结果 MTS检测结果显示,柠檬苦素在500μmol·L-1浓度下对多种胃癌细胞增殖的半数抑制率不足50％.但划痕愈合实验发现,在40μmol·L-1浓度下可抑制多种胃癌细胞(BGC-823、SGC-7901、AGS、MGC-803)的迁移.体内实验显示,给药处理21 d,25 mg·kg-1柠檬苦素能预防并抑制裸鼠胃癌移植瘤转移灶的数量,且在该剂量下对小鼠体质量影响不明显.上述结果表明:柠檬苦素剂量依赖性地抑制小鼠肿瘤组织中的STAT3磷酸化和MMP-9蛋白的表达,但对增殖标记物Ki-67的抑制效果不明显.通过免疫组化及Western blot发现,该单体化合物能降低BGC-823细胞STAT3酪氨酸705位点的磷酸化(pTyr705-STAT3).结论 柠檬苦素能有效预防并抑制胃癌细胞的转移,其作用机制与抑制STAT3的活化有关.